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HDAC抑制剂(Valproic acid)
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HDAC抑制剂(Valproic acid)公司正在出售的产品:NR1/NMDAR1 谷受体1抗体 规格: 0.1mlphospho-Tau protein(Ser396) 磷酸化微管相关蛋白抗体 规格: 0.1mlHMGCL 三羟基三甲基辅A裂解抗体 规格: 0.2mlIL-9 白介素9抗体 规格: 0.1mlBMP9 骨形态发生蛋白9抗体 规格: 0.2mlTomoregulin-1
  HDAC抑制剂(Valproic acid)的详细资料:

培养操作步骤

1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;

2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);

3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;

4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;

5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

产品参数:

中文名称

英文名称

产品规格

产品货号

HDAC抑制剂(Valproic acid)

Valproic acid

1mL(10mM)|1g

BJ-01X8328

商品详细介绍:

Valproic acid是HDAC抑制剂,具有抗肿瘤活性。

注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!

:99-66-1

别名:VPA;2-Propylpentanoic Acid

纯度:98.0%

分子量:144.21

储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。

实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

2.png 

实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;

2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;

3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;

4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;

5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点:

1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。

2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。

4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。

5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。

6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

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小鼠 TRIB3 基因全长ORF克隆猴子瘦素(LEP)免疫试剂盒现货供应

小鼠 PDK / PDZ binding kinase / TOPK 基因全长ORF克隆猴子肾上腺髓质素(ADM)免疫试剂盒*直销

小鼠 OXSR1 / OSR1 基因全长ORF克隆猴子神经型一氧化氮合成(nNOS)免疫试剂盒进口、组装

小鼠 TRIB2 基因全长ORF克隆猴子神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫试剂盒进口、分装

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HDAC抑制剂(Valproic acid)尿素(Urea)检测试剂盒(二乙酰一肟微板法)  100T  甲苯胺蓝-DNA平板  9cm

尿素(Urea)检测试剂盒(二乙酰一肟比色法)  100T  100mL 二甲基亚砜 Dimethyl Sulfoxide(DMSO)  室温干燥避光保存

肌酐(Cr)检测试剂盒(PA速率比色法)  100T  50T 登革热病毒Ⅰ、Ⅱ型PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

肌酐(Cr)检测试剂盒(去蛋白终点微板法)  100T  300µL 山羊抗人IgG(H+L),辣根过氧化物标记 Goat Anti-Human IgG(H+L),HRP Conjugate -20℃保存

核酸检测试剂盒(定磷比色法)  50T  2 ug pYr-AdShuttle- 3 pYr-AdShuttle- 3 低温运输,-20℃保存

维生素B1检测试剂盒(荧光光度法)  50T  50次 一步法质粒 DNAout 2.0 One-Step Plasmid DNAOUT 2.0 常温保存(溶液A需4℃保存)

维生素B2检测试剂盒(荧光光度法)  50T  2 ug pET-42a(+) pET-42a(+) 低温运输,-20℃保存

脱氢抗坏血酸(DHA)检测试剂盒(菲咯啉微板法)  100T  100mL RIPA裂解液(中) RIPA Lysis Buffer(M) -4℃保存

原果胶(SP)检测试剂盒(微板比色法)  50T  1瓶 A549(GFP)细胞株 A549(GFP) 低温运输和保存

氨基酸(AA)检测试剂盒(茚三酮微板法)  100T  1套 玻璃匀浆器,1 mL Glass Homogenizer 常温保存

氨基酸(AA)检测试剂盒(茚三酮比色法)  100T  20次 多点突变试剂盒 Multipoints Mutagenesis Kit -20℃保存

 


产品相关关键字: HDAC 抑制剂
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