细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1) 准备F-12K培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。 2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。 二. 细胞处理: 1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 中文名称:Ire1抑制剂(STF-083010) 英文名称:STF-083010 产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg 产品货号:BJ-01X7215 英文名称:STF-083010 产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg STF-083010是一种Ire1抑制剂。STF-083010抑制Ire1核酸内切酶活性,不影响激酶活性。 注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途! :307543-71-1 纯度:98.0% 分子量:317.38 储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
细胞培养方法: 1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代 ①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次; ②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化; ③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止; ④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清; ⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基; ⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。 2、细胞复苏: ①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。 ②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。 3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种 ①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶) ②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化; ③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞; ④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。 操作规程 1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时. 2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。 3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。 4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。 5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。 6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。 7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。 8、结果分析 a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100 b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90) Radix glehniae北沙参LAMP鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周Mouse Anti-human IgG(3D3) 鼠抗人IgG单克隆抗体 规格: 1mgS100B S100B蛋白抗体 规格: 0.1ml Tropiladaps clareae亮热厉螨(小蜂螨病)LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周PI3 Kinase p110 delta 磷脂酰肌醇激催化亚单位D抗体 规格: 0.1mlKLK15 激肽释放15抗体 规格: 0.2ml Amapari virus(AMAV)阿马帕里病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Salmonella typhimurium O 伤体蛋白O抗原抗体 规格: 0.2mlphospho-β catenin(Tyr142) 磷酸化β 连环素蛋白抗体 规格: 0.1ml Hemorrhagic Fever with Renal Syndrome Virus(HFRSV)肾综合症出血热病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周MTCH1 细胞增诱导蛋白60(早老素相关蛋白) 规格: 0.2mlPhospho-CEBP beta (Thr235) 磷酸化转录调节因子CEBP β抗体 规格: 0.1ml Trichodysplasia Spinulosa Associated Polyomavirus(TSPyV) TS多瘤病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周TLR9/CD289 Toll样受体9抗体 规格: 0.1mlFAAH1 脂肪酸酰胺水解1抗体 规格: 0.2ml Borrelia recurrentis回归热疏螺旋体(回归热包柔螺旋体)LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周LZTFL1 亮拉链转录因子样1抗体 规格: 0.1mlC3orf18 3号染色体开放阅读框18抗体 规格: 0.2ml Xiphinema cobb剑线虫PCR试剂盒属 植物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周CDCREL/SEPT5 细胞周期调控相关蛋白1 规格: 0.2mlRabbit Anti-Monkey IgM 兔抗猴IgM 规格: 1mg Flos inulae旋覆花PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周SLC33A1 乙酰辅A转运蛋白1抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-horse IgG/Cy5.5 Cy5.5标记的兔抗马IgG 规格: 0.1ml Staphylococcus capitis头状葡萄球LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周GERP/TRIM8/RNF27 环指蛋白27抗体 规格: 0.2mlClassical swine fever virus, CSFV 猪瘟毒抗体 规格: 0.2ml Aeromonas punctata斑点气单胞探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周PID1 磷酸相互作用结构域蛋白1抗体 规格: 0.2mlAngiotensin III 管紧张素III抗体 规格: 0.2ml Ire1抑制剂(STF-083010)人肺表面活性物质相关蛋白B(SP-B)免疫试剂盒进口、分装 麦芽浸粉 英文名称: 产品规格:200g 人Z-DNA结合蛋白1(ZBP1)免疫试剂盒现货供应 猪葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)免疫试剂盒现货供应 犬基质金属蛋白1(MMP-1)免疫试剂盒进口、组装 小鼠水通道蛋白2(AQP-2)免疫试剂盒进口、组装 马(COR)免疫试剂盒进口、分装 小鼠成神经细胞瘤RAS 病毒(v-ras)癌基因同源物免疫试剂盒进口、分装 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)免疫试剂盒进口、分装 兔子环鸟苷(cGMP)免疫试剂盒进口、组装 大鼠抗内皮细胞抗体(AECA)免疫试剂盒现货供应
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