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menin-mLL相互作用抑制剂(MI-503)
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menin-mLL相互作用抑制剂(MI-503)公司正在出售的产品:Rabbit anti-MG IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555标记的兔抗爪沙鼠IgG 规格: 0.1mlphospho-SCNN1B(Thr615) 磷酸化上皮钠通道β2抗体 规格: 0.1mlMLLT11 髓系/淋巴或混合型白11抗体 规格: 0.2mlRNF32 环指蛋白32抗体
  menin-mLL相互作用抑制剂(MI-503)的详细资料:

培养操作步骤

1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;

2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);

3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;

4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;

5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

产品参数:

中文名称

英文名称

产品规格

产品货号

menin-mLL相互作用抑制剂(MI-503)

MI-503

1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg

BJ-01X8558

商品详细介绍:

MI-503是高效,有的menin-mLL相互作用的小分子抑制剂。

注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!

CAS号:1857417-13-0

纯度:98.99%

分子量:564.63

储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。

实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

2.png 

实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;

2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;

3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;

4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;

5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点:

1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。

2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。

4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。

5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。

6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

大鼠 NTRK2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签盘基网柄(Dicyostelium)细胞趋化作用(chemotaxis)  10次

大鼠 NTRK2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签软琼脂检测试剂盒  

小鼠 VDR 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签细细胞趋化作用(chemotaxis)软琼脂检测试剂盒  10次

小鼠 IL17A 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签通用型细胞粘附性(cell adhesion)比色法检测试剂盒  50次

小鼠 IL17A 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签通用型细胞粘附性(cell adhesion)荧光检测试剂盒  50次

小鼠 IL2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签通用型血液凝集分子纤维蛋白检测法(Fibrometer)分析试剂盒  50次

小鼠 IL2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签肝素(heperin)纤维蛋白检测法(Fibrometer)分析试剂盒  50次

小鼠 LIGHT / TNFSF14 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签肝素(heperin)活性比色法定量检测试剂盒  20次

小鼠 LIGHT / TNFSF14 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签肝素(heperin)活性比色法定量检测试剂盒  20次

小鼠 CCR2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签水蛭素(hirudin)纤维蛋白检测法(Fibrometer)分析试剂盒  50次

小鼠 CCR2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签水蛭素(hirudin)活性比色法定量检测试剂盒  20次

menin-mLL相互作用抑制剂(MI-503)phospho-IKK beta(Tyr199)  磷酸化KB抑制蛋白激β抗体 规格: 0.1ml

SSTR1  生抑素受体1抗体 规格: 0.1ml

TXNRD1  硫氧环蛋白还原1抗体 规格: 0.2mlMCK10/CD167a/DDR1  神经上皮酪激抗体(激10) 规格: 0.1ml

Cystatin E/M  半胱蛋白抑制剂6抗体 规格: 0.1ml

Histone H3 (mono methyl K79)  单甲基组蛋白H3K9抗体 规格: 0.2ml

RNF32  环指蛋白32抗体 规格: 0.2ml

BLAME/SLAMF8  BLAME抗体 规格: 0.1ml

NHLRC2  非霍奇金重复蛋白2抗体 规格: 0.2mlphospho-MEK5(Ser142)  磷酸化丝裂原活化蛋白激激5抗体 规格: 0.1ml

POC5  细胞中心粒蛋白抗体 规格: 0.2ml

KLHDC9  KLHDC9蛋白抗体 规格: 0.2ml

ACCN1/BNaC1/ASIC2  脑钠通道蛋白1抗体 规格: 0.2mlTSPY1  睾特异定蛋白质编码Y1抗体 规格: 0.1ml

 


产品相关关键字: menin-mLL相互作用 抑制剂
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