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多靶点抑制剂(ETP-46464)
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多靶点抑制剂(ETP-46464)公司正在出售的产品:NEDD8 泛素样蛋白NEDD8抗体 规格: 0.2mlphospho-GABBR1 (Ser923) 磷酸化gamma氨基丁酸B型受体1抗体 规格: 0.1mlPGT/Slco2a1 溶质载体蛋白家族21成员2抗体 0.2mlPhospho-TH (Ser31) 磷酸化酪羟化抗体 规格: 0.1mlPhospho-Dab1 (Ser4
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多靶点抑制剂(ETP-46464)

ETP-46464

1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

BJ-01X8580

商品详细介绍:

ETP-46464是可渗透入细胞的多靶点抑制剂,对mTOR,ATR,DNA-PK,PI3-Kα和ATM的IC50分别为0.6,14,36,170和545nM。

注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!

CAS号:1345675-02-6

纯度:99.34%

分子量:470.52

储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。

实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

培养操作步骤

1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;

2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);

3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;

4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;

5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
2.png

实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;

2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;

3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;

4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;

5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点:

1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。

2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。

4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。

5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。

6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

IL18 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签BAD蛋白表达检测试剂盒  10/20次

CXCL12 / SDF1b 转录变体2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签?体外肌动蛋白(ACTIN)结合分子(binding molecules)检测试剂盒  20次

CXCL12 / SDF1b 转录变体2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签体外波形蛋白(Vimentin)结合分子(binding molecules)检测试剂盒  20次

EBI3 / IL27b 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签体外微管蛋白(tubulin)结合分子(binding molecules)检测试剂盒  20次

EBI3 / IL27b 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签肌动蛋白聚合作用(polymerization)检测试剂盒  20次

ZAP 转录变体1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签体外微管蛋白聚合作用(polymerization)比色法检测试剂盒(300微克,标准样)  20次

CD146 / MCAM 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签纯化微管蛋白(Tubulin)  1毫克/5毫克

CD146 / MCAM 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签体外微管蛋白聚合作用(polymerization)荧光检测试剂盒  20次

VHR 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签体内微管蛋白聚合作用(polymerization)检测试剂盒  5次

VHR 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签细胞骨架(肌动蛋白微丝;F-ACTIN)绿色荧光染色试剂盒  10次

CD106 / VCAM1 转录变体1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签细胞骨架(肌动蛋白单体;G-ACTIN)红色荧光染色试剂盒  10次

多靶点抑制剂(ETP-46464)Tumstatin/COL4A3  瘤抑素抗体 规格: 0.2ml

SIP1  Smad蛋白相互作用蛋白1抗体 规格: 0.2ml

SRF/SAP2/MCM1  生激素释放因子抗体(清应答因子) 规格: 0.2ml

MGAT5  糖蛋白GNTVA抗体 规格: 0.2ml

phospho-Crkl (Tyr207)  磷酸化接蛋白CrkL抗体 规格: 0.1ml

TRAF6  瘤坏死因子受体相关因子6抗体 规格: 0.1mlphospho-Androgen Receptor (Ser212)  磷酸化雄激素受体抗体 规格: 0.1ml

MKK7/ERK7  丝裂原活化蛋白激MKK7抗体 规格: 0.1ml

SNF5  转录调控激活蛋白SNF5抗体 规格: 0.2mlCCR-3  细胞表面趋化因子受体3抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-Biotin/AP  碱性磷酸(AP)标记的兔抗抗体IgG 规格: 0.1ml

Donkey Anti-rabbit IgG/PE-Cy3  PE-Cy3标记的驴抗兔IgG 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-Bov IgG/PE  PE标记的兔抗牛IgG  规格: 0.1mlPhospho-PLC gamma 1(Ser1248)  磷酸化磷酯Cγ1抗体 规格: 0.1ml

 


产品相关关键字: 多靶点 抑制剂
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