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PC-3M-IE8(人前列腺癌高转移细胞株)
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产品特点:
PC-3M-IE8(人前列腺癌高转移细胞株)在冷冻保存之前,应观察细胞生长是否良好 且存活率高,冻存的细胞密度为80 – 90 %冷冻前检测细胞是否保有其*性质,例如是否有杂细胞或者支原体等。
  PC-3M-IE8(人前列腺癌高转移细胞株)的详细资料:

培养操作步骤
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布; 
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片); 
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时; 
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中; 
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

本公司代理ATCC细胞,提供售前售后一条龙服务,若要获取详细的说明书或价格信息,请咨询在线客服。

产品名称

英文名称

规格

PC-3M-IE8(人前列腺癌高转移细胞株)

PC-3M-IE8 (human prostate cancer cell line)

5×106cells

产品特点:
1、 使用方便:不需昂贵设备。
2、 可以处理各种细菌菌体,包括新鲜菌液和冰冻菌体。
3、 将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
4、 采用温和的中性裂解组分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
6、 紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
7、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本试剂盒中不有EDTA,与金属螯和层析等兼容。

细胞培养技巧:
一、冻存时的注意事项:
1. 在冷冻保存之前,应观察细胞生长是否良好(log phase) 且存活率高,冻存的细胞密度为80 – 90 %
2. 冷冻前检测细胞是否保有其*性质,例如是否有杂细胞或者支原体等。
3. 使用的DMSO 应为试剂级等级,以5~10 ml 小体积分装,4 度避光保存,勿作多次解冻。使用的甘油也应为试剂级等级,以高压蒸汽
灭菌后避光保存。在开启后一年内使用,因长期储存后对细胞会有毒性。
4. 冷冻保存的细胞浓度:
4-1. 正常的成纤维细胞: 1-3x 10^6 cells/ml
4-2 杂交瘤细胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,细胞浓度不要太高,某些杂交瘤会因冷冻浓度太高而在解冻24 小时后。
4-3.贴壁肿瘤细胞: 1 x 10^6,依细胞种类而异。腺癌类的细胞解冻后须较高之浓度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。
4-4. 悬浮细胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴类细胞须至少5 x 10^6 cells/ml。
5. 冷冻保护剂浓度为5 %或10 % DMSO,若是不确定细胞之冷冻条件,在做冷冻保存之同时,亦应作一个backup culture,以防止冷冻失败。 
冻存的步骤:
1. 冷冻前一日前更换半量或全量培养基,观察细胞生长情形。
2. 使用ScienCell冻存液 混合均匀,置于室温下待用。
3. 依细胞传代培养的操作,收集培养好的细胞,取少量细胞悬浮液(约0.1 ml) 计数细胞浓度及冻前存活率。
4. 离心,去除上清液,加入适量冷冻保存溶液,使细胞浓度为1-5 x 10^6 cells/ml,混合均匀,
分装于已标示*之冷冻保存管中,1 ml/vial,并取少量细胞悬浮液作污染检测。
5. 冷冻保存方法1: 冷冻管置于4 度10 分钟→ -20 度 30 分钟→ -80 度16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vapor phase 长期储存。
6. 冷冻保存方法2: 冷冻管置于已设定程序之等速降温机中,再放入液氮槽中。程序为: program 7: HB CELL 。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

小鼠细胞外基质蛋白1(ECM1)酶联免疫吸附测定试剂盒

小鼠细胞外信号调节激酶1(ERK1)酶联免疫吸附测定试剂盒

小鼠细胞外信号调节激酶2(ERK2)酶联免疫吸附测定试剂盒

小鼠B因子(BF)酶联免疫吸附测定试剂盒

小鼠第八因子相关抗原(FVIIIAg)酶联免疫吸附测定试剂盒

小鼠凋亡相关因子(FAS/CD95)酶联免疫吸附测定试剂盒

小鼠肌动蛋白聚合蛋白(FSCN)酶联免疫吸附测定试剂盒

小鼠表皮脂肪酸结合蛋白5(FABP5)酶联免疫吸附测定试剂盒

小鼠回肠脂肪酸结合蛋白6(FABP6)酶联免疫吸附测定试剂盒

小鼠F-框蛋白2(FBXO2)酶联免疫吸附测定试剂盒

小鼠雌激素受体β(ERβ)酶联免疫吸附测定试剂盒

小鼠铁蛋白(FE)酶联免疫吸附测定试剂盒

小鼠纤维蛋白(FBL)酶联免疫吸附测定试剂盒

小鼠原纤维蛋白1(FBN1)酶联免疫吸附测定试剂盒

PC-3M-IE8(人前列腺癌高转移细胞株)繁福松;纯品型;标准品;有证书 CAS  规格: 0.1g 订购|咨询

右旋炔呋;纯品型;标准品;有证书 CAS 23031-38-1 规格: 0.1g 订购|咨询

噻嗪;纯品型;标准品;有证书 CAS 153719-23-4 规格: 0.1g 订购|咨询

戊唑醇;纯品型;标准品;有证书 CAS 107534-96-3 规格: 0.25g 订购|咨询

五味子醇甲-对照品;有报告 CAS 7432-28-2 规格: 20mg 订购|咨询

D-棉籽糖;纯品型;标准品;有证书 CAS 17629-30-0 规格: 0.25g 订购|咨询

维生素B2;纯品型;标准品;有证书 CAS 83-88-5 规格: 0.25g 订购|咨询

10-甲氧基喜树碱 CAS  规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

Cimiracemoside D CAS 290821-39-5 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

苦参新醇 F CAS 34981-24-3 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

美商陆酸 CAS 54928-05-1 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

紫杉醇C CAS 153415-45-3 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

7-木糖苷-10-脱乙酰基紫杉醇 CAS 90332-63-1 规格: HPLC≥40%;20mg 订购|咨询

氧化白藜芦醇 CAS 29700-22-9 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

 

 

产品相关关键字: PC-3M-IE8 人前列腺癌高转 5×106cells
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