LAD2 人肥大细胞

一、细胞基本信息

• 细胞全称：LAD2 人肥大细胞系

• 细胞来源：人急性髓系白血病患者外周血分离建立的永生化肥大细胞系

• 细胞特性：悬浮或半贴壁生长，保留成熟肥大细胞核心表型，表达FcεRI高亲和力IgE受体、受IgE交联刺激后可稳定释放组胺、β-己糖胺酶等炎症介质，是目前过敏相关研究常用的人源肥大细胞模型。

• 推荐应用场景：IgE介导的过敏反应机制研究、肥大细胞活化抑制剂药物筛选、炎症因子释放通路验证。

二、培养基配方

该细胞对营养要求较高，常规RPMI 1640基础培养基需针对性补充关键组分：

1. 基础培养基：RPMI 1640 含L

2. 血清添加：10% 热灭活胎牛血清，提前筛选适配的稳定血清批次

3. 核心添加剂：重组人IL-3 10 ng/mL、重组人SCF（干细胞因子）100 ng/mL

4. 可选添加：双抗1%，避免支原体污染

三、标准传代操作流程

1. 培养条件：37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱中静置培养

2. 传代密度：严格维持细胞接种密度在 ‌2×10^5 个/mL‌，最高培养密度不超过1×10^6 个/mL，密度过高会导致细胞活率骤降、表型丢失

3. 传代操作：无需消化，直接在超净台内吸取部分细胞悬液，用预热的新鲜培养基按1:2~1:3的比例稀释分瓶，补加新鲜培养基后放回培养箱即可。

4. 换液策略：每2~3天半量换液，离心收集细胞后弃去一半旧培养基，加入等量预热新鲜培养基重悬，避免全量换液导致细胞自分泌生长因子丢失，引发细胞凋亡。

四、关键质控与注意事项

1. 活率要求：正常培养状态下细胞活率应长期维持在90%以上，活率低于80%时需检查SCF、IL-3活性是否失效，或血清批次是否适配。

2. 表型验证：每10代需通过流式细胞术验证FcεRI、CD117（c-Kit）的阳性表达率，确认细胞未发生表型漂移。

3. 活化实验标准操作：开展IgE介导脱颗粒实验时，提前用特异性IgE抗体致敏细胞过夜，次日加入抗原交联刺激，30分钟后检测上清中β-己糖胺酶释放率，正常活化组释放率应达到总酶活的30%~50%。

4. 禁忌：绝对不能使用不含SCF的培养基长期培养细胞，会在3~5天内快速引发细胞凋亡、肥大细胞核心功能表型丢失。

5. 公司正在经营的其它产品：

6. 脑膜细胞包装：5 × 105次方（1ml）

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8. 脑微血管内皮细胞包装：5 × 105次方（1ml）

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12. 尿道上皮细胞包装：5 × 105次方（1ml）

13. 皮肤癌组织源性原代细胞包装：5 × 105次方（1ml）/1ml

14. 皮肤肥大细胞包装：5 × 105次方（1ml）

15. 皮肤肥大细胞包装：5 × 105次方（1ml）

16. 皮肤肥大细胞包装：5 × 105次方（1ml）

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18. 破骨细胞包装：5 × 105次方（1ml）

19. 破骨细胞包装：5 × 105次方（1ml）

20. 破骨细胞包装：5 × 105次方（1ml）

21. 破骨细胞包装：5 × 105次方（1ml）

22. 脐带单核细胞包装：5 × 105次方（1ml）

23. 脐动脉内皮细胞包装：5 × 105次方（1ml）