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NCI-H596(人肺腺鳞癌细胞)规格
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产品特点:
NCI-H596(人肺腺鳞癌细胞)规格在冷冻保存之前,应观察细胞生长是否良好 且存活率高,冻存的细胞密度为80 – 90 %冷冻前检测细胞是否保有其*性质,例如是否有杂细胞或者支原体等。
  NCI-H596(人肺腺鳞癌细胞)规格的详细资料:

冻存的步骤:
1. 冷冻前一日前更换半量或全量培养基,观察细胞生长情形。
2. 使用ScienCell冻存液 混合均匀,置于室温下待用。
3. 依细胞传代培养的操作,收集培养好的细胞,取少量细胞悬浮液(约0.1 ml) 计数细胞浓度及冻前存活率。
4. 离心,去除上清液,加入适量冷冻保存溶液,使细胞浓度为1-5 x 10^6 cells/ml,混合均匀,
分装于已标示*之冷冻保存管中,1 ml/vial,并取少量细胞悬浮液作污染检测。
5. 冷冻保存方法1: 冷冻管置于4 度10 分钟→ -20 度 30 分钟→ -80 度16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vapor phase 长期储存。
6. 冷冻保存方法2: 冷冻管置于已设定程序之等速降温机中,再放入液氮槽中。程序为: program 7: HB CELL 。

本公司代理ATCC细胞,提供售前售后一条龙服务,若要获取详细的说明书或价格信息,请咨询在线客服。

产品名称

英文名称

规格

NCI-H596(人肺腺鳞癌细胞)规格

NCI-H596 (human lung adeno squamous cell carcinoma)

5×106cells

产品特点:
1、 使用方便:不需昂贵设备。
2、 可以处理各种细菌菌体,包括新鲜菌液和冰冻菌体。
3、 将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
4、 采用温和的中性裂解组分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
6、 紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
7、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本试剂盒中不有EDTA,与金属螯和层析等兼容。

细胞培养技巧:
一、冻存时的注意事项:
1. 在冷冻保存之前,应观察细胞生长是否良好(log phase) 且存活率高,冻存的细胞密度为80 – 90 %
2. 冷冻前检测细胞是否保有其*性质,例如是否有杂细胞或者支原体等。
3. 使用的DMSO 应为试剂级等级,以5~10 ml 小体积分装,4 度避光保存,勿作多次解冻。使用的甘油也应为试剂级等级,以高压蒸汽
灭菌后避光保存。在开启后一年内使用,因长期储存后对细胞会有毒性。
4. 冷冻保存的细胞浓度:
4-1. 正常的成纤维细胞: 1-3x 10^6 cells/ml
4-2 杂交瘤细胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,细胞浓度不要太高,某些杂交瘤会因冷冻浓度太高而在解冻24 小时后。
4-3.贴壁肿瘤细胞: 1 x 10^6,依细胞种类而异。腺癌类的细胞解冻后须较高之浓度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。
4-4. 悬浮细胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴类细胞须至少5 x 10^6 cells/ml。
5. 冷冻保护剂浓度为5 %或10 % DMSO,若是不确定细胞之冷冻条件,在做冷冻保存之同时,亦应作一个backup culture,以防止冷冻失败。 
培养操作步骤
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布; 
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片); 
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时; 
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中; 
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

羟基异亮氨 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询 人金属调整转录因子1(MTF1)ELISA试剂盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠细胞角蛋白18-M65(CK 18-M65)ELISA试剂盒,英文名:CK 18-M65 ELISA Kit

拉西地平 质量规格:>99%,BR Lacidipine 炭黑曲霉 Aspergillus carbonarius小鼠神经干细胞(EGFP标记)

诃子鞣质,诃子鞣 质量规格:HPLC≥96%,标准品 Chebulagic acid BT-549(人腺管细胞)厚垣孢普可尼亚菌 Pochonia chlamydosporia

盐莫索尼定  英文名称:SONY moxifloxacin hydrochloride   保存:-20℃   规格:20mg 化原癌基因c-Raf抗体

阿莫曲普坦苹果盐 质量规格:>98.5%,BR Amotriptan malate 营养琼脂/普通肉汤琼脂培养基/NA一般细菌培养250克国产/进口

富马氯马斯汀  英文名称:Fumaric acid chloride Mastin   保存:-20℃   规格:50mg 环指蛋白5抗体

佛手柑素 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询 人肝细胞生长因子受体(HGF receptor)ELISA试剂盒人96T78-5000 pg/mL大鼠维生素B6(VB6)ELISA试剂盒,英文名:VB6 ELISA Kit

3',5'-二溴-4'-羟基(>97.0%(GC)) 质量规格:>97.0%(GC) 3',5'-Dibromo-4'-hydroxyacetophenone 异常汉逊酵母 Hansenula anomala香菇 Lentinula edodes

澳洲茄胺;澳州茄胺 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询 ELISA Kit for Human Coagulation factor X小鼠热休克转录因子1(HSF1)ELISA试剂盒,英文名:HSF1 ELISA Kit

果糖  英文名称:Fructose   保存:-20℃   规格:100mg Notch转录调控蛋白RBPJK抗体

七叶皂苷钠 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询 人葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠糖原化酶M(PYGM)ELISA试剂盒,英文名:PYGM ELISA Kit

匹多莫德  英文名称:Pi do Maude   保存:-20℃   规格:100mg 核糖体S6激酶RSK2抗体

茶黄素-3-没食子酯 订购|咨询 规格: HPLC≥93%;20mg ELISA Kit for Human Protein S100-A7大鼠肾上腺素能受体β2(ADRβ2)ELISA试剂盒,英文名:ADRβ2 ELISA Kit

NCI-H596(人肺腺鳞癌细胞)规格芍药苷;Paeoniflorin CAS 23180-57-6 规格: 20mg 订购|咨询

人参皂苷Rb2;GINSESIDE CAS 11021-13-9 规格: 20mg 订购|咨询

去氢荷包牡丹碱;Dehydrodicen CAS  规格: 10mg 订购|咨询

秦皮乙素;Esculetin CAS 305-01-1 规格: 20mg 订购|咨询

鸟苷;Guasine CAS 118-00-3 规格: 20mg 订购|咨询

木栓;Friedelin CAS 559-74-0 规格: 5mg 订购|咨询

木蝴蝶苷A;Oroxin A CAS  规格: 20mg 订购|咨询

胡黄连苷III;Picroside II CAS 64461-95-6 规格: 10mg 订购|咨询

柯诺辛B;Coryxine B CAS  规格: 20mg 订购|咨询

25-甲氧基-原人参三醇;25-OCH3 CAS  规格: 20mg 订购|咨询

红镰-6-O-β-龙胆二糖苷; CAS  规格: 20mg 订购|咨询

亥茅酚苷;Sec-O-Glucosylh CAS 80681-44-3 规格: 20mg 订购|咨询

甘露糖;D-Mannitol CAS 69-65-8 规格: 100mg 订购|咨询

蜂斗菜内酯A;Bakkelide A CAS 19906-72-0 规格: 20mg 订购|咨询

 

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