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SK-MES-1(人肺鳞癌细胞)说明书
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SK-MES-1(人肺鳞癌细胞)说明书在冷冻保存之前,应观察细胞生长是否良好 且存活率高,冻存的细胞密度为80 – 90 %冷冻前检测细胞是否保有其特有性质,例如是否有杂细胞或者支原体等。
  SK-MES-1(人肺鳞癌细胞)说明书的详细资料:

培养操作步骤
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布; 
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片); 
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时; 
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中; 
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

本公司代理ATCC细胞,提供售前售后一条龙服务,若要获取详细的说明书或价格信息,请咨询在线客服。

产品名称

英文名称

规格

SK-MES-1(人肺鳞癌细胞)说明书

SK-MES-1 (human lung squamous cell carcinoma)

5×106cells

产品特点:
1、 使用方便:不需昂贵设备。
2、 可以处理各种细菌菌体,包括新鲜菌液和冰冻菌体。
3、 将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
4、 采用温和的中性裂解组分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
6、 紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
7、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本试剂盒中不有EDTA,与金属螯和层析等兼容。

细胞培养技巧:
一、冻存时的注意事项:
1. 在冷冻保存之前,应观察细胞生长是否良好(log phase) 且存活率高,冻存的细胞密度为80 – 90 %
2. 冷冻前检测细胞是否保有其特有性质,例如是否有杂细胞或者支原体等。
3. 使用的DMSO 应为试剂级等级,以5~10 ml 小体积分装,4 度避光保存,勿作多次解冻。使用的甘油也应为试剂级等级,以高压蒸汽
灭菌后避光保存。在开启后一年内使用,因长期储存后对细胞会有毒性。
4. 冷冻保存的细胞浓度:
4-1. 正常的成纤维细胞: 1-3x 10^6 cells/ml
4-2 杂交瘤细胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,细胞浓度不要太高,某些杂交瘤会因冷冻浓度太高而在解冻24 小时后。
4-3.贴壁肿瘤细胞: 1 x 10^6,依细胞种类而异。腺癌类的细胞解冻后须较高之浓度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。
4-4. 悬浮细胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴类细胞须至少5 x 10^6 cells/ml。
5. 冷冻保护剂浓度为5 %或10 % DMSO,若是不确定细胞之冷冻条件,在做冷冻保存之同时,亦应作一个backup culture,以防止冷冻失败。 
冻存的步骤:
1. 冷冻前一日前更换半量或全量培养基,观察细胞生长情形。
2. 使用ScienCell冻存液 混合均匀,置于室温下待用。
3. 依细胞传代培养的操作,收集培养好的细胞,取少量细胞悬浮液(约0.1 ml) 计数细胞浓度及冻前存活率。
4. 离心,去除上清液,加入适量冷冻保存溶液,使细胞浓度为1-5 x 10^6 cells/ml,混合均匀,
分装于已标示完全之冷冻保存管中,1 ml/vial,并取少量细胞悬浮液作污染检测。
5. 冷冻保存方法1: 冷冻管置于4 度10 分钟→ -20 度 30 分钟→ -80 度16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vapor phase 长期储存。
6. 冷冻保存方法2: 冷冻管置于已设定程序之等速降温机中,再放入液氮槽中。程序为: program 7: HB CELL 。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
酰胺 质量规格:>99%,BR Formamide 大鼠胰岛细胞完全培养基100mL

猫爪草 订购|咨询 规格: 1g 豚鼠钩端螺旋体IgG(Leptospira)ELISA试剂盒,英文名:Leptospira ELISA Kit

贝母素 订购|咨询 规格: HPLC≥98%;20mg 大鼠Ⅸ型胶原α1(COL9α1)ELISA试剂盒,英文名:COL9α1 ELISA Kit

欧当归内酯A;Levistilide A 订购|咨询 规格: 20mg 豚鼠白介素2(IL2)ELISA试剂盒,英文名:IL2 ELISA Kit

头孢哌钠 质量规格:870μg-1015μg /mg,USP,BR Cefoperazone sodium U-118 MG(人脑星形胶质母细胞瘤)5×106cells/瓶×2

人参皂苷Rh2 订购|咨询 规格: 20mg 人线粒体25-羧基维生素D-1α羟化酶(CYP27B1)ELISA试剂盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠黑色素瘤(Melanoma)ELISA试剂盒,英文名:Melanoma ELISA Kit

伏格列波糖 质量规格:>99%,BR Voglibose 大鼠小鼠杂合神经胶质瘤细胞英文名称:NG108-15

丹參B鎂 订购|咨询 规格: HPLC≥98%;20mg/vial α2巨球蛋白样蛋白1抗体 α2ML1 FFA ELISA Kit 游离脂肪(FFA)ELISA试剂盒

7-羟基-4-基香;4-Methy 订购|咨询 规格: 20mg G蛋白偶联受体172B抗体 PRB1 ELISA Kit 碱性唾液脯氨丰富蛋白1(PRB1)ELISA试剂盒

干姜对照药材 订购|咨询 规格: 1g ELISA Kit for Human Proheparin-binding EGF-like growth factor小鼠防御素α5(DEFα5)ELISA试剂盒,英文名:DEFα5 ELISA Kit

奥沙利铂 质量规格:>99%,BR,细胞培养级 Oxaliplatin 角蛋白19(KRT19)重组蛋白英文名称:Recombinant Keratin 19 (KRT19)

雌酚 订购|咨询 规格: 20mg 人水通道蛋白4(AQP-4)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠前列腺特异性抗原(PSA)ELISA试剂盒,英文名:PSA ELISA Kit

-7-O-葡萄糖苷 订购|咨询 规格: HPLC≥98%;10mg 人促状腺激素受体(Thyrotropin receptor)ELISA试剂盒人96T31.2-2000 pg/mL大鼠激肽释放酶4(KLK4)ELISA试剂盒,英文名:KLK4 ELISA Kit

SK-MES-1(人肺鳞癌细胞)说明书维生素K3 CAS 58-27-5 规格: 20mg 订购|咨询

大豆皂苷BB CAS 51330-27-9 规格: 10mg 订购|咨询

骨化三醇 CAS 32222-06-3 规格: 10mg 订购|咨询

α-亚酸 CAS 463-40-1 规格: 20mg 订购|咨询

雪松醇 CAS 77-53-2 规格: 20mg 订购|咨询

吴茱萸次碱 CAS 84-26-4 规格: 20mg 订购|咨询

三七皂苷Ft1 CAS  规格: 20mg 订购|咨询

圣草酚 CAS 552-58-9 规格: 20mg 订购|咨询

芹菜苷 CAS 26544-34-3 规格: 20mg 订购|咨询

牛磺鹅去氧胆酸 CAS 516-35-8 规格: 20mg 订购|咨询

氧化槐定碱 CAS 54809-74-4 规格: 20mg 订购|咨询

栎樱酸 CAS 6812-81-3 规格: 20mg 订购|咨询

异莲心碱 CAS 6817-41-0 规格: 20mg 订购|咨询

异荭草素 CAS 4261-42-1 规格: 20mg 订购|咨询

 

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