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AhR激动剂(Indole-3-carbinol)
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AhR激动剂(Indole-3-carbinol)公司正在出售的产品:LSP1 白细胞F肌动蛋白结合蛋白抗体 规格: 0.2mlPAR4 蛋白激活受体4抗体 规格: 0.2mlMouse Anti-Bov IgG/RBITC 罗丹明标记的小鼠抗牛IgG 规格: 0.1mlKLHL26 Kelch样蛋白26抗体 规格: 0.2mlTFR2/Transferrin Receptor 2 转铁
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AhR激动剂(Indole-3-carbinol)

Indole-3-carbinol

1mL(10mM)|200mg|1g

BJ-01X8526

商品详细介绍:

Indole-3-carbinol是芳烃受体(AhR)的激动剂。

注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!

CAS号:700-06-1

别名:3-Indolemethanol

纯度:98.0%

分子量:147.17

储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。

实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

培养操作步骤

1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;

2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);

3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;

4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;

5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
2.png

实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;

2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;

3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;

4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;

5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点:

1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。

2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。

4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。

5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。

6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

大鼠 ENG 基因全长ORF克隆酵母细胞周期G1早期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒  10次

大鼠 TGFBR2 基因全长ORF克隆酵母细胞周期G1期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒  10次

大鼠 BMPR1A 基因全长ORF克隆酵母细胞周期G1后期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒  10次

大鼠 ACVR1B 基因全长ORF克隆酵母细胞周期S早期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒  10次

大鼠 GFRA2 基因全长ORF克隆酵母细胞周期S期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒  10次

大鼠 TDGF1 基因全长ORF克隆酵母细胞周期S后期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒  10次

大鼠 FGF1 基因全长ORF克隆酵母细胞周期G2期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒  10次

大鼠 ACVRL1 基因全长ORF克隆酵母细胞周期M期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒  10次

大鼠 GDF5 基因全长ORF克隆通用型酵母样品细胞周期G1/S和G2/M期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒  10次

大鼠 GDF10 基因全长ORF克隆通用型细胞周期同步(SYNCHRONY)细胞流式分析试剂盒  20次

大鼠 LEFTY2 基因全长ORF克隆细胞有丝分裂(指数)流式细胞仪检测试剂盒  10/20次

AhR激动剂(Indole-3-carbinol)phospho-GIT1(Ser375)  磷酸化G蛋白偶联受体激相互作用蛋白1 规格: 0.1ml

KDEL (ER Marker)  赖,天冬,谷,亮相关序列抗体 规格: 0.2ml

MBNL3  毒蕈碱样蛋白3抗体 规格: 0.2mlNGN3/Neurogenin 3  神经元素3抗体 规格: 0.1ml

Phospho-eNOS(Thr495)  磷酸化氮合成3抗体(内皮型) 规格: 0.1ml

VLDL Receptor  极脂蛋白受体抗体 规格: 0.1ml

FBXW8/FBXO29  FBXW8蛋白抗体 规格: 0.2mlphospho-NF1(Ser2515)  磷酸化1型神经纤维瘤抗体 规格: 0.1ml

UCP-3  线粒体脱偶连蛋白3抗体 规格: 0.1ml

Goat Anti-rat IgG/Cy5  Cy5标记的羊抗大鼠IgG 规格: 0.1ml

P21/CDKN1A  p21蛋白抗体 规格: 0.1mlChondroitin Sulfate  抗体 规格: 0.2ml

phospho-PRKCQ(Ser676)  磷酸化蛋白激C theta抗体 规格: 0.1ml

CARD15  凋亡加强结构域蛋白15抗体 规格: 0.2mlDonkey Anti-Goat IgG/Cy7  Cy7标记的驴抗羊IgG 规格: 0.1ml

 


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