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Bcr-Abl抑制剂(GNF-2)
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Bcr-Abl抑制剂(GNF-2)公司正在出售的产品:Myosin-XVIIIb 肌球蛋白XVIIIb抗体 0.2mlMyotilin 肌收蛋白MYOT抗体 规格: 0.1mlMouse Anti-rat IgG/Cy7 Cy7标记的小鼠抗大鼠IgG 规格: 0.1mlSR1/Sorcin 抗药蛋白抗体 规格: 0.2mlKCNC1 离子通道蛋白Kv3.1抗体 规格: 0.1ml
  Bcr-Abl抑制剂(GNF-2)的详细资料:

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Bcr-Abl抑制剂(GNF-2)

GNF-2

1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg

BJ-01X8568

商品详细介绍:

GNF-2是非ATP竞争性的Bcr-Abl选择性抑制剂,IC50为140nM。

注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!

CAS号:778270-11-4

纯度:94.88%

分子量:374.32

储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。

实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

培养操作步骤

1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;

2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);

3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;

4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;

5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
2.png

实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;

2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;

3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;

4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;

5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点:

1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。

2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。

4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。

5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。

6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

EZH2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签细胞膜蛋白萃取试剂盒  20次

EZH2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签细胞表面蛋白(surface protein)萃取试剂盒  20次

HSPA8 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签精浆蛋白(semen plasma protein)萃取试剂盒  20次

CDC25A 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签线虫细胞分离试剂盒  20次

CDC25A 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签细胞ATP生物发光法定量检测试剂盒  50次

CD63 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签细胞总抗氧化能力(TAC)化学发光法定量检测试剂盒  50次

CD63 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签细胞氧化应激活性氧(ROS)NBT比色法定量检测试剂盒  100次

PRDX2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签精浆(seminal plasma)氧化应激活性氧(ROS)NBT比色法定量检测试剂盒  100次

PRDX2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签细胞氧化应激活性氧(ROS)WST-1比色法定量检测试剂盒  50次

CDH13 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签精浆(seminal plasma)氧化应激活性氧(ROS)WST-1比色法定量检测试剂盒  50次

CDH13 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签细胞氧化应激活性氧/抗氧化能力比值检测试剂盒  20次

Bcr-Abl抑制剂(GNF-2)COX3  氧化亚基3抗体 规格: 0.2ml

Mouse Anti-Rabbit IgM/PE  PE标记的小鼠抗兔IgM 规格: 0.1ml

phospho-FAK(Ser722)  磷酸化粘着斑激抗体 规格: 0.1ml

Histone H1  组蛋白H1抗体 规格: 0.1ml

SAMD9  SAMD9蛋白抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-Avidin/PE-CY5  PE-CY5标记的兔抗亲和素 规格: 0.1ml

AP-TNAP/ALPL  碱性磷酸抗体 规格: 0.1ml

Heme Oxygenase 1/HO-1  红素氧合 1/热休克蛋白32抗体 规格: 0.1ml

ProSAPiP1   含脯突触相关蛋白相互作用蛋白1抗体 规格: 0.2ml

APAF1(NT)  凋亡蛋白活性因子-1抗体(N端) 规格: 0.1ml

Phospho-TAK1(Thr187)  磷酸化转化生因子β活化激1 规格: 0.1mlCOLEC11  凝集蛋白家族11抗体 规格: 0.2ml

HSD3a  羟基类固醇脱3α抗体 规格: 0.2ml

 


产品相关关键字: Bcr-Abl 抑制剂
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