设为主页 加入收藏 联系我们

公司公告

更多公告>>
产品展示
当前位置:首页 > 产品展示 > >>>>吖啶橙-EB双染色试剂盒
吖啶橙-EB双染色试剂盒
点击放大
产品型号:
产品报价:
产品特点:
吖啶橙-EB双染色试剂盒公司正在出售的产品:0.312-20 ng/mL 人血红素结合蛋白(HPX)ELISA试剂盒 0.312-20 ng/mL 人淀粉样蛋白ΒA4(APP)ELISA试剂盒 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Dihydropteridine reductase 0.078-5 ng/ml ELISA Kit for Human Integri
  吖啶橙-EB双染色试剂盒的详细资料:

操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。

8、结果分析

a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)

中文名称:吖啶橙-EB双染色试剂盒

英文名称:Acridine Orange(AO)/EB Double Stain Kit

产品规格:50ml*2|250ml*2

产品货号:BJ-01X6478

橙能透过胞膜完整的细胞,嵌入细胞核DNA,与双链DNA结合后发出绿色荧光,溴化乙锭(EB)仅能透过胞膜受损的细胞,嵌入核DNA,发橘红色荧光。凋亡的细胞呈现为染色增强,荧光更为明亮,均匀一致的圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅不一的结构样特征。二者很容易判别。在荧光显微镜下观察,可见四种细胞形态:活细胞(VN),核染色质着绿色并呈正常结构;早期凋亡细胞(VA),核染色质着绿色呈固缩状或圆珠状;晚期凋亡细胞(NVA),核染色质为橘红色并呈固缩状或圆珠状;非凋亡的死亡细胞(NVN),核染色质着橘红色并呈正常结构。本产品AO、EB溶液浓度分别为100ug/ml,所含稳定剂不影响实验效果。

使用方法:(仅供参考)

使用前先根据用量,将AO溶液和EB溶液按1:1混合成工作液,先用现配。

对于贴壁细胞或爬片,去掉培养基,用PBS洗两遍去除残余培养基和未贴壁细胞,加入新的PBS;如果需要观察全部细胞特性,保留未贴壁细胞,可以直接在培养基中加入工作液。按照每毫升培养基或PBS中加入20ul工作液即可。室温放置2-5min后于荧光显微镜下观察。

对于悬浮细胞,可直接加入工作液或离心收集细胞后在PBS中加入工作液。按照每毫升培养基或PBS中加入20ul工作液即可。室温放置2-5min后于荧光显微镜下观察。

注意事项:

含酚红培养基对观察有轻微影响。建议使用无酚红培养基。

染色液工作浓度和染色时间可根据具体实验情况适当调整,以期达到佳效果。

储存条件:4℃避光密封保存,有效期一年

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备F-12K培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。


2.png

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

Caprine Arthritis-encephalitis Virus(CAEV)山羊关节炎-脑脊髓炎病毒染料法荧光定量PCR试剂盒(同MVV) 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

牛源性成分PCR检测试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Semen raphani莱菔子探针法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周

Medulla junci灯心草LAMP鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周

Radix cynanchi atrati白薇LAMP鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周

小麦源性成分PCR试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Gasterophilus spp.马虻LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Mycoplasma hyosynoviae猪滑液支原体探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Rhizoma chuanxiong川芎LAMP鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周

Raccoonpox virus浣熊痘病毒LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Raillietina cesticillus有轮瑞氏绦虫探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Fusarium virguliforme北美大豆猝死综合症病PCR试剂盒 植物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

吖啶橙-EB双染色试剂盒冰冻切片组织钙钠交换体(NCX)蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒  10/20次

酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基(YPD) 英文名称:Yeast Peptone Dextrose Agar 产品规格:250g

GST融合蛋白因子10α(FACTOR Xa)切试剂盒  10次

细胞环氧化(CYCLOOXYGENASE)总活性比色法定量检测试剂盒  20次

呼吸链依赖性纯化线粒体氧化应激活性氧(ROS)初级荧光测定试剂盒  20次

制检定培养基 英文名称:Nystatin Test Medium 产品规格:250g

细胞BTK激活性定量检测试剂盒(A/B/C)  20次

蛋白电泳尼罗红染色试剂盒  20次

食物污染ATP生物发光法定量检测试剂盒  50次

木糖发酵管 英文名称: 产品规格:20支

细胞HISTONE H3蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒  10/20次

 


产品相关关键字: 吖啶橙-EB双染色 试剂盒
 如果你对吖啶橙-EB双染色试剂盒感兴趣,想了解更详细的产品信息,填写下表直接与厂家联系:

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
 相关同类产品:
MTT检测试剂盒  MTS细胞增殖与细胞毒性检测试剂盒  增强型CCK-8试剂盒 
JC-10荧光探针  线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)  中性红细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 
碘化丙啶PI  Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒  Caspase 1 活性检测试剂盒 
 
联系人:王经理
点击这里给我发消息
电话:
86-021-57763112
手机:
18917018169

智慧城市网

推荐收藏该企业网站