设为主页 加入收藏 联系我们

公司公告

更多公告>>
产品展示
当前位置:首页 > 产品展示 > >>>>Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒
Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒
点击放大
产品型号:
产品报价:
产品特点:
Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒公司正在出售的产品:3.12-200 pmol/L 人胰岛素原(PI)ELISA试剂盒 0.312-20 ng/mL 人成纤维细胞生长因子10(FGF-10)ELISA试剂盒 1.56-100U/mL ELISA Kit for Human Transcription factor 4 125-8000 pg/mL ELISA Kit for
  Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒的详细资料:

操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。

8、结果分析

a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(完全培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)

中文名称:Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒

英文名称:

产品规格:50T|100T

产品货号:BJ-01X6496

产品背景:

细胞凋亡是细胞的基本特征之一,它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定和一些疾病发生过程等方面起着十分重要的作用。

在正常细胞中,磷脂酰丝(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝(PS)由脂膜内侧翻向外侧。在体内,巨噬细胞可以识别翻转到细胞膜表面的PS 从而将这些程序性死亡的细胞清除,因此凋亡过程中并不伴随局部的炎症反应,而在细胞坏死的过程中则常常伴随着炎症反应。

AnnexinⅤ是一种分子量为35-36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的PS 高亲和力特异性结合。PS 外翻发生在细胞核破裂,DNA 片段化以及凋亡相关蛋白出现之前,这使得Annexin V 与PS的结合成为凋亡早期的一种重要检测标志事件。

检测原理:

在正常的活细胞中,磷脂酰丝(phosphotidylserine,PS)位于细胞膜的内侧,但在早期凋亡的细胞中,PS 从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。

Annexin-Ⅴ能与PS 高亲和力结合。可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝与凋亡早期细胞的胞膜结合。用标记了PE的AnnexinⅤ作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。细胞坏死的过程中也会发生细胞膜损伤,坏死的细胞会结合Annexin V-PE。

Annexin V-PE 通常与细胞膜非渗透性核酸荧光染料联合使用以检测凋亡细胞。常用的染料是7-AAD。正常细胞和早期凋亡细胞的细胞膜是完整的,核酸染料7-AAD 不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和坏死细胞,7-AAD 能够透过细胞膜与细胞核结合呈现红色。

7-AAD/Annexin V-PE试剂盒将AnnexinⅤ与7-AAD匹配使用,可以将凋亡早期的细胞和晚期的细胞以及死细胞区分开来。坏死细胞可以同时与Annexin V-PE和7-AAD 结合显色,而7-AAD 则被排除在活细胞(PE阴性)和早期凋亡细胞(PE阳性)之外。在没有巨噬细胞的情况下,凋亡的后阶段会像细胞坏死一样发生整个细胞的解体,从而使凋亡晚期的细胞也同时被PE和7-AAD 结合染色呈现双阳性。

储存条件:染色液2-8℃避光保存;结合液2-8℃保存;长期不用-20℃保存。

Annexin V-PE染色液避免反复冻融,冻融2次以上可能会失效。长期保存分装后-20℃保存。

有效期:一年。

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备F-12K培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。


2.png

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

Karolinska Institute Polyomavirus(KAPyV)KI多瘤病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Perkinsus olseni奥尔森派琴虫LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Chrysomya bezziana倍赞氏金蝇探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Mycoplasma mycoides cluster丝状支原体簇LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Covert Mortality Nodavirus(CMNV)偷死野田村病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Leucocytozoon sabrezis沙氏住白  原虫探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Staphylococcus hominis人葡萄球LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Semen pharbitidis牵牛子LAMP鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周

Brucella spp.布鲁氏杆属通用LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Cortex acanthopanacis五加皮LAMP鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周

Duck Adenovirus鸭腺病毒LAMP试剂盒(暂停) 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Powassan病毒RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒β萘(β-naphthol)免疫试剂盒特价直销

猪心钠肽(ANP)免疫试剂盒特价直销

犬透明质酸2(HAase 2)免疫试剂盒进口、分装

小鼠K1(VK1)免疫试剂盒进口、分装

绵羊γ干扰素(IFN-γ)免疫试剂盒进口、组装

小鼠二肽基肽Ⅳ(DPPⅣ)免疫试剂盒现货供应

大鼠粘胶蛋白/肌腱蛋白C(TN-C)免疫试剂盒现货供应

兔子神经肽P(NP-P)免疫试剂盒进口、分装

大鼠化腺苷酸活化蛋白激(pAMPK)免疫试剂盒特价直销

人脂肪甘油三酯脂(ATGL)免疫试剂盒进口、组装

大鼠白介素1β(IL-1β)免疫试剂盒进口、组装

 


产品相关关键字: Annexin V-PE 细胞凋亡 检测试剂盒
 如果你对Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒感兴趣,想了解更详细的产品信息,填写下表直接与厂家联系:

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
 相关同类产品:
MTT检测试剂盒  MTS细胞增殖与细胞毒性检测试剂盒  增强型CCK-8试剂盒 
JC-10荧光探针  线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)  中性红细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 
碘化丙啶PI  Caspase 1 活性检测试剂盒  依托泊甙溶液(100mM) 
 
联系人:王经理
点击这里给我发消息
电话:
86-021-57763112
手机:
18917018169

智慧城市网

推荐收藏该企业网站