设为主页 加入收藏 联系我们

公司公告

更多公告>>
产品展示
当前位置:首页 > 产品展示 > >>>>Caspase 8分光光度法检测试剂盒
Caspase 8分光光度法检测试剂盒
点击放大
产品型号:
产品报价:
产品特点:
Caspase 8分光光度法检测试剂盒公司正在出售的产品:0.156-10 ng/mL 人热休克蛋白40(HSP40)ELISA试剂盒 0.156-10 ng/mL 病毒通用型(AIV-U)核酸检测试剂盒(RT-PCR法) 3.12-200 ng/mL 人基质金属蛋白抑制因子3(TIMP-3)ELISA试剂盒 0.625-40 ng/mL 人激肽释放10(KLK-10)ELISA试剂盒 0.312
  Caspase 8分光光度法检测试剂盒的详细资料:

操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。

8、结果分析

a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(完全培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)

中文名称:Caspase 8分光光度法检测试剂盒

英文名称:Caspase-8 Colorimetric Assay Kit

产品规格:20T|50T|100T

产品货号:BJ-01X6372

本试剂盒适用于培养细胞及新鲜组织caspase-8 检测。Caspase 家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用。在CD95 凋亡途径中, Caspase-8 作为上游的级联酶,可被TNF 激活。受细胞表面受体(如Fas)的激活,Caspase-8 能引起下游级联酶的活性,如Caspase-3。Caspase-8 在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中,没有活性;但在细胞发生凋亡阶段,它可被激活。Caspase-8 分光光度法检测试剂盒就是将caspase-8 序列特异性的多肽偶联至发色基团,当该底物被caspase-8 剪切后,发色基团即游离出来,可通过酶标仪或分光光度计(λ=405nm 或400nm)测定其吸光值,可考察caspase-8 的活化程度。

注意事项

1. 对某些凋亡诱导剂引起的细胞凋亡可能存在非依赖于Caspase-8 活化的机制,这种情况时利用本试剂盒检测Caspase-8 活性无明显改变,需要考虑凋亡机制中的其他信号通路。

2. Caspase-8 Substrate 避光保存及使用。

3. 细胞数量需达到3~5×106 个或新鲜组织100mg,以便能达到测定需要的100~200μg 蛋白的要求,因为Caspase-8 的活性与细胞裂解液的蛋白含量有关,如测定的OD 值偏低,可通过增加细胞数量或组织量的方法来提高蛋白量。

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备F-12K培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。


2.png

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

Salmonella abortus ovis羊流产沙门氏LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Simian Virus 5 (SV5)猴病毒5 染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Batrachochytrium dendrobatidis箭毒蛙壶探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

火鸡源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Rickettsia prowazekii普氏立克次氏体探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Fructus rosae laevigatae金樱子探针法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周

Koi Herpesvirus(KHV)锦鲤疱疹病毒Sph基因染料法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用) 50次 低温 20度 一年 2-4周

小鼠源性成分LAMP试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

甲型流感()H1N1/H3亚型双重染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Radix et rhizoma rhei大黄LAMP鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周

Canine Distemper Virus(CDV)犬瘟热病毒RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Streptococcus gallolyticus解没食子酸链球LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Caspase 8分光光度法检测试剂盒血清/血浆游离脂肪酸连续循环比色法定量检测试剂盒  10次

冰冻切片组织脘蛋白(PRION)蛋白表达NBT  10/20次

细胞总蛋白萃取试剂盒  20次

SOB培养基 英文名称:SOB Medium 产品规格:250g

5%乳糖发酵管 英文名称: 产品规格:20支

细胞氧化应激活性氧/抗氧化能力比值检测试剂盒  20次

蛋白定量样品预处理试剂  100次

TUBULIN蛋白表达西方杂交分析试剂盒  5次

细胞HHV6(HUMAN HERPESVIRUS 6)病毒  20次

细同化型硝酸盐还原活性比色法定量检测试剂盒  20次

细胞沉默调节蛋白1 (SIRT1)活性比色法定量检测试剂盒  20/50次

产品相关关键字: Caspase 8 分光光度法 检测试剂盒
 如果你对Caspase 8分光光度法检测试剂盒感兴趣,想了解更详细的产品信息,填写下表直接与厂家联系:

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
 相关同类产品:
MTT检测试剂盒  MTS细胞增殖与细胞毒性检测试剂盒  增强型CCK-8试剂盒 
JC-10荧光探针  线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)  中性红细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 
碘化丙啶PI  Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒  Caspase 1 活性检测试剂盒 
 
联系人:王经理
点击这里给我发消息
电话:
86-021-57763112
手机:
18917018169

智慧城市网

推荐收藏该企业网站