设为主页 加入收藏 联系我们

公司公告

更多公告>>
产品展示
当前位置:首页 > 产品展示 > >>>>TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(Alexa Fluor 647)
TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(Alexa Fluor 647)
点击放大
产品型号:
产品报价:
产品特点:
TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(Alexa Fluor 647)公司正在出售的产品:31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Somatotropin 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Serum amyloid P-component 31.2-2000 pg/mL 人血小板衍生生长因子B(PDGF subunit B)ELISA
  TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(Alexa Fluor 647)的详细资料:

操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。

8、结果分析

a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(完全培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)

中文名称:TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(Alexa Fluor 647)

英文名称:TUNEL Apoptosis Detection Kit (Alexa Fluor 647)

产品规格:20 rxn

产品货号:BJ-01X6424

本试剂盒应用范围广,可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况,也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。

细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。

TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling) 细胞凋亡检测试剂盒(Alexa Fluor 647)可以用来检测组织细胞在凋亡晚期过程中细胞核DNA的断裂情况。其原理是在末端脱氧核糖核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)的作用下,在基因组DNA断裂时暴露出的3′-羟基(3′-OH)末端掺入Alexa Fluor 647-12-dUTP,从而可以用荧光显微镜或流式细胞仪检测。Alexa Fluor 647为红色荧光染料,具有很高的稳定性和很强的亮度。

试剂盒组份:

5×Equilibration Buffer——————————1.25 ml

Alexa Fluor 647-12-dUTP Labeling Mix———100 μl

Recombinant TdT Enzyme——————————20 μl

Proteinase K(2 mg/ml)———————————40 μl

注意事项

1) 需自备用于洗涤细胞的PBS,用于封片的抗荧光淬灭封片液,用于固定的4%多聚。

2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件:-20℃,有效期一年。

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备F-12K培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。


2.png

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

兔源性成分染料法荧光定量PCR试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Eurytrema coelomaticum腔阔盘吸虫LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Anaplasma spp.无浆体(无形体)通用探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Mycoplasma agalactiae无乳支原体LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Pigeon Paramyxovirus(PPMV)鸽副粘病毒RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

牦牛源性成分染料法荧光定量PCR试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Penicillium viridicatum纯绿青霉LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Folium pyrrosiae石韦染料法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周

Pseudomonas syringae pv. tomato丁香假单胞杆番茄致病变种PCR试剂盒 植物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Alcelephine Herpesvirus 1(AlHV-1狷羚疱疹病毒1型探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

鸡源性成分染料法荧光定量PCR试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Rhizoma cimicifugae升麻PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周

TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(Alexa Fluor 647)麦芽浸粉 英文名称: 产品规格:200g

活体细胞半胱蛋白-5(CASPASE-5)活性原位荧光染色检测试剂盒  20次

硫乙醇酸盐流体培养基管 英文名称: 产品规格:7.5ml*20支/盒

冰冻切片组织CASPASE-9蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒  10/20次

双抗巧克力琼脂 英文名称:Double anti-chocolate agar 产品规格:250g

通用型HSV2(HERPES SIMPLX2)病毒定性检测试剂盒  20次

UVM1添加剂 英文名称:UVM Supplement1 产品规格:1ml*5支

一氧化氮(NO)终点比色法定量检测试剂盒  100次

β-半乳糖苷活性化学发光法定量检测试剂盒  20次

纯化溶体功能中性红检测试剂盒  20次

细胞二酯4(PDE4)活性荧光定量检测试剂盒  10次

 


产品相关关键字: TUNEL 细胞凋亡 检测试剂盒
 如果你对TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(Alexa Fluor 647)感兴趣,想了解更详细的产品信息,填写下表直接与厂家联系:

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
 相关同类产品:
MTT检测试剂盒  MTS细胞增殖与细胞毒性检测试剂盒  增强型CCK-8试剂盒 
JC-10荧光探针  线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)  中性红细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 
碘化丙啶PI  Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒  Caspase 1 活性检测试剂盒 
 
联系人:王经理
点击这里给我发消息
电话:
86-021-57763112
手机:
18917018169

智慧城市网

推荐收藏该企业网站