中文名称:激酶2(Chk2)抑制剂(BML-277) 英文名称:BML-277 产品规格:1mL(10mM)|10mg|50mg 产品货号:BJ-01X7761 BML-277是一种选择性的检测点激酶2(Chk2)抑制剂,IC50为15nM。 注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途! :516480-79-8 别名:Chk2 Inhibitor II;C 3742 纯度:97.14% 分子量:363.8 储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1) 准备F-12K培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。 2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。 二. 细胞处理: 1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
细胞培养方法: 1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代 ①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次; ②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化; ③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止; ④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清; ⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基; ⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。 2、细胞复苏: ①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。 ②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。 3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种 ①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶) ②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化; ③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞; ④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。 Human Endogenous Retroviruses(HERV)人类内源性逆转录病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用) 50次 低温 负20度 一年 2-4周 蟹源性成分LAMP试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 Buffalo Pox Virus(BPXV)水牛正痘病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 Pseudomonas avenae燕麦假单胞PCR试剂盒 植物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 Semen strychni马钱子PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周 Foot-and-Mouth Disease Virus(FMDV)口蹄疫病毒SAT3亚型RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 Theileria lestoquardi莱氏泰勒虫探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 Fructus arctii牛蒡子PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周 Leishmania spp.利什曼原虫通用LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 Bibersteinia trehalosi海藻百伯史坦探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 激酶2(Chk2)抑制剂(BML-277)豆甾醇 英文名:Stigmasterol 分子式: C29H48O 分子量:412.69 :201-482-7 棉酚 英文名:Gossypol 分子式: C30H30O8 分子量:518.55 :303-45-7 栎瘿酸 英文名:Roburic acid 分子式: C30H48O2 分子量:440.70 :6812-81-3 灵芝酸A 英文名:Ganoderic acid A 分子式: C30H42O7 分子量:514.65 :81907-62-2 灵芝酸B 英文名:Ganoderic acid B 分子式: C30H44O7 分子量:516.67 :81907-61-1 芦荟宁 英文名:Aloenin 分子式: C19H22O1 分子量:410.37 :38412-46-3 一叶萩碱 英文名:Securinine 分子式: C13H15NO2 分子量:217.26 :5610-40-2 支脱皂苷元 英文名:Gitogenin 分子式: C27H44O4 分子量:432.64 :511-96-6 左旋千金藤啶碱 英文名:L-Stepholidine 分子式: C19H21NO4 分子量:327.37 :16562-13-3 (-)-丁香树脂酚-4-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷 英文名:(-)-Syringaresnol-4-O-β-D-apiofuranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside 分子式:C33H44O17 分子量:712.69 :136997-64-3 (+)-松脂素-β-D-吡喃葡萄糖苷 英文名:(+)-pinoresinol-β-D-glucoside; (+)-pinoresinol-4-O-beta-D-glucopyranoside 分子式: C26H32O11 分子量:520.5 :69251-96-3 操作规程 1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时. 2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。 3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。 4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。 5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。 6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。 7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。 8、结果分析 a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100 b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
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