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Trk抑制剂(GNF-5837)
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Trk抑制剂(GNF-5837)公司正在出售的产品:RASSF7 RAS家族关联结构域蛋白7抗体 规格: 0.2mlGCDGP15/SABP 囊性组织液体蛋白15抗体 规格: 0.1mlPhospho-Torc1/Crtc1 (Ser151) 磷酸化CREB转录共激活因子TORC1抗体 规格: 0.1mlADAR1 (N-terminus) 双链RNA苷酸脱氨基抗体(N端) 0.2mlMI
  Trk抑制剂(GNF-5837)的详细资料:

中文名称:Trk抑制剂(GNF-5837)

英文名称:GNF-5837

产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg

产品货号:BJ-01X8043

GNF-5837是Trk抑制剂,对表达融合蛋白Tel-TrkC,Tel-TrkB和Tel-TrkA的细胞IC50分别为7,9和11nM。

注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!

CAS号:1033769-28-6

纯度:97.22%

分子量:535.49

储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备F-12K培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。


QQ截图20220509112004.png

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

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NPC1L1抑制剂(Ezetimibe)  1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg  Ezetimibe5g 8- 羟基硫酸盐 8-Hydroxyquinoline Sulfate   室温避光保存

中性鞘磷脂酶抑制剂(GW4869)  1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg  GW486950T 蜡样芽孢杆菌PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

ROCK抑制剂(GSK269962A)  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg  GSK269962A5g 3-(3,4- 二羟基苯 )-L-  3-(3,4-Dithydroxyphenyl)-L-Alanine  室温干燥保存

低氧诱导因子脯氨酰羟化酶抑制剂(Daprodustat)  2mg|5mg|10mg|50mg|100mg  Daprodustat100mL ADA Buffer,0.5M,pH7.4   ADA Buffer,0.5M,pH7.4   常温保存

P2Y12受体抑制剂(Clopidogrel hydrogen sulfate)  1mL(10mM)|100mg|500mg  Clopidogrel hydrogen sulfate10mL DNA上样液 (红色),6× DNAON  4℃保存

myosin激活剂(Omecamtiv mecarbil)  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg  Omecamtiv mecarbil2 ug pGBKT7-Lam pGBKT7-Lam 低温运输,-20℃保存

CYP2C19和CYP2B6抑制剂(Fenofibrate)  1mL(10mM)|200mg|5g|10g  Fenofibrate液体乳糖培养基 Fluid Lactose Medium 250g

LXR激动剂(GW3965 hydrochloride)  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg  GW3965 hydrochloride1瓶 COS-7 SV40细胞株 COS-7 SV40 低温运输和保存

Na+,K+-ATPase抑制剂(Istaroxime hydrochloride)  1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg  Istaroxime hydrochloridePALCAM琼脂平板(9cm) PALCAM Agar 10个/包

HMG-CoA reductase抑制剂(Atorvastatin hemicalcium salt)  1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg  Atorvastatin hemicalcium salt500U 热敏 Antarctic Phosphatase -20℃保存

操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。

8、结果分析

a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(完全培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)

 


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