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辅酶ⅠNAD测试盒50管/24样
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  辅酶ⅠNAD测试盒50管/24样的详细资料:

产品属性:

产品名称:辅酶ⅠNAD测试盒50管/24样

检测方法:可见分光光度法

产品分类:辅酶Ⅰ系列

产品规格: 50管/24样

检测方法:可见分光光度法

产品货号:BJ-01S9511


商品介绍:

测定意义

辅酶ⅠNAD(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,NAD+是糖酵解(EMP)和三羧酸循环(TCA)的主要氢受体,生成的NADH经呼吸电子链(ETC)传递把电子交给氧,在合成ATP的同时,形成大量的ROS,同时NADH再生为NAD+。糖、脂、蛋白质三大代谢物质分解中的氧化反应绝大部分通过这一体系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于评价糖酵解和TCA循环的强弱。较高的NAD(H)及NADH/NAD+比值说明细胞呼吸耗氧量较高,处于过氧化状态。此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循环。另外,NAD+降解产物对细胞信号传导、代谢和基因表达等具有重要的调控作用。

测定原理

分别用酸性和碱性提取液提取样品中NAD+和NADH,NADH通过PMS的递氢作用,还原氧化型噻唑蓝(MTT)为甲瓒,在570nm下检测吸光值;而NAD+可被乙醇脱氢酶还原为NADH,进一步采用MTT还原法检测。

需自备的仪器和用品

可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

图片1.png

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

① 组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取


② 细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10)

4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。
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基质细胞衍生因子2样蛋白1(SDF2L1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Stromal Cell Derived Factor 2 Like Protein 1 (SDF2L1)    96T    Rattus norvegicus (Rat)

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成纤维生长因子受体底物3(FRS3)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Fibroblast Growth Factor Receptor Substrate 3 (FRS3)    96T    Rattus norvegicus (Rat)

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白介素1ε(IL1ε)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Interleukin 1 Epsilon (IL1e)    96T    Mus musculus (Mouse)

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生长因子受体结合蛋白10(Grb10)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Growth Factor Receptor Bound Protein 10 (Grb10)    96T    Rattus norvegicus (Rat)

生长因子受体结合蛋白14(Grb14)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Growth Factor Receptor Bound Protein 14 (Grb14)    96T    Homo sapiens (Human)

生长因子受体结合蛋白14(Grb14)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Growth Factor Receptor Bound Protein 14 (Grb14)    96T    Mus musculus (Mouse)

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。


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