培养操作步骤 ：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

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产品特点:
1、 使用方便:不需昂贵设备。
2、 可以处理各种细菌菌体，包括新鲜菌液和冰冻菌体。
3、 将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
4、 采用温和的中性裂解组分，保持蛋白活性。
5、 含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
6、 紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
7、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本试剂盒中不有EDTA，与金属螯和层析等兼容。
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细胞培养技巧：
一、冻存时的注意事项：
1. 在冷冻保存之前，应观察细胞生长是否良好(log phase) 且存活率高，冻存的细胞密度为80 – 90 ％
2. 冷冻前检测细胞是否保有其*性质，例如是否有杂细胞或者支原体等。
3. 使用的DMSO 应为试剂级等级，以5~10 ml 小体积分装，4 度避光保存，勿作多次解冻。使用的甘油也应为试剂级等级，以高压蒸汽
灭菌后避光保存。在开启后一年内使用，因长期储存后对细胞会有毒性。
4. 冷冻保存的细胞浓度：
4-1. 正常的成纤维细胞: 1-3x 10^6 cells/ml
4-2 杂交瘤细胞: 1~3 x 10^6 cells/ml，细胞浓度不要太高，某些杂交瘤会因冷冻浓度太高而在解冻24 小时后。
4-3.贴壁肿瘤细胞: 1 x 10^6，依细胞种类而异。腺癌类的细胞解冻后须较高之浓度，而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。
4-4. 悬浮细胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴类细胞须至少5 x 10^6 cells/ml。
5. 冷冻保护剂浓度为5 %或10 ％ DMSO，若是不确定细胞之冷冻条件，在做冷冻保存之同时，亦应作一个backup culture，以防止冷冻失败。 
冻存的步骤：
1. 冷冻前一日前更换半量或全量培养基，观察细胞生长情形。
2. 使用ScienCell冻存液 混合均匀，置于室温下待用。
3. 依细胞传代培养的操作，收集培养好的细胞，取少量细胞悬浮液(约0.1 ml) 计数细胞浓度及冻前存活率。
4. 离心，去除上清液，加入适量冷冻保存溶液，使细胞浓度为1-5 x 10^6 cells/ml，混合均匀，
分装于已标示*之冷冻保存管中，1 ml/vial，并取少量细胞悬浮液作污染检测。
5. 冷冻保存方法1: 冷冻管置于4 度10 分钟→ -20 度 30 分钟→ -80 度16～18 小时(或隔夜) → 液氮槽vapor phase 长期储存。
6. 冷冻保存方法2: 冷冻管置于已设定程序之等速降温机中，再放入液氮槽中。程序为: program 7: HB CELL 。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
二基酰胺 订购|咨询 规格： 1ml 化Bcl-2抗体 Ank-B ELISA Kit 锚蛋白B(Ank-B)ELISA试剂盒

抑霉唑标准溶液(10μg/ml,u=2%) 质量规格：10μg/ml,u=2% Imazalil solution NZM肉汤/NZM BrothBR100克国产/进口

岩黄连  英文名称：Yan Huanglian   保存：-20℃   规格：1g 类固受体激活蛋白2抗体  

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去氧尿苷 订购|咨询 规格： 100mg 酰胆碱酯酶抗体 CCL26 ELISA Kit 趋化因子26(CCL26)ELISA试剂盒

2-溴-4'-基酰(>98.0%(GC)(T)) 质量规格：>98.0%(GC)(T) 2-Bromo-4'-phenylacetophenone 小鼠成肌细胞泡盛曲霉 Aspergillus awamori

去吴茱萸碱 订购|咨询 规格： HPLC≥98%;10mg 成熟相关蛋白BOULE抗体 CC16 ELISA Kit 克拉拉细胞蛋白(CC16)ELISA试剂盒

十七碳酯  英文名称：Seventeen methyl carbonate   保存：-20℃   规格：20mg p21蛋白抗体

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哈巴俄苷 订购|咨询 规格： 20mg 人Ⅱ型前胶原羧基端肽(PⅡCP)ELISA试剂盒人96T3.12-200 ng/mL大鼠成纤维细胞生长因子10(FGF-10)ELISA试剂盒，英文名：FGF-10 ELISA Kit

莽草 质量规格：≥98%,BR Shikimic acid RT4(人膀胱移行细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2

头孢克肟  英文名称：Cefixime   保存：-20℃   规格：100mg 胃粘液素抗体  

BEL-7402(人肝癌细胞)规格ECT2  上皮细胞转化蛋白2抗体 规格: 0.1ml

SMARCA1/SNF2L  解旋酶SNF2L抗体 规格: 0.2ml

Rabbit Anti-Bovine IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350标记的兔抗牛IgM 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-rat IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488标记的兔抗大鼠IgG 规格: 0.1ml

V.cholera Ogawa  01群小川型霍乱弧菌抗体 规格: 0.2ml

ANKRD20A3  锚蛋白重复结构域蛋白20A3抗体 规格: 0.2ml

GM-CSF  粒细胞-巨噬细胞克隆刺激因子抗体 规格: 0.1ml

XPC  DNA补充修复XPC细胞蛋白抗体 规格: 0.1ml

Donkey Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy7  PE-Cy7标记的驴抗豚鼠IgG 规格: 0.1ml

Tuberin/TSC2  马铃薯球蛋白(结节性硬化)抗体 规格: 0.2ml

USP9X  泛素特异性蛋白酶9X抗体 规格: 0.2ml

AUP1/Ancient ubiquitous protein 1  原始广泛存在蛋白1抗体 规格: 0.2ml

Insulin Receptor/CD220  胰岛素受体抗体 规格: 0.1ml

Elastin  弹性蛋白α抗体 规格: 0.1ml