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NF-κB抑制剂(Oleandrin)
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NF-κB抑制剂(Oleandrin)公司正在出售的产品:Cytokeratin 5/CK5 细胞角蛋白5抗体 0.1mlFLAP/5-lipoxygenase activating protein 5脂氧合激活蛋白抗体 规格: 0.2mlIntegrin alpha 2/CD49b 整合素α2抗体 规格: 0.1mlPhospho-INPPL1(Ser576) 肌醇聚磷酸盐磷酸样蛋白1抗
  NF-κB抑制剂(Oleandrin)的详细资料:

操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。

8、结果分析

a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(完全培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)

中文名称:NF-κB抑制剂(Oleandrin)

英文名称:Oleandrin

产品规格:1mL(10mM)|2mg|5mg

产品货号:BJ-01X8212

Oleandrin(一种毒性强心苷)在各种培养的细胞系(U937,SKOV3,人上皮细胞和T细胞)中抑制NF-κB活性,在PC3细胞系培养中诱导程序性细胞死亡中的。

注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!

CAS号:465-16-7

纯度:99.84%

分子量:576.72

储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备F-12K培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。


2.png

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

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NF-κB抑制剂(Oleandrin)甘油PBS封片剂  10ml|50ml  15mL 苏木素染色液 Hematoxylin Staining Solution 室温保存

甘油明胶封固液  10ml|50ml  100mL MOPS Buffer,0.5M,pH6.0   MOPS Buffer,0.5M,pH6.0   常温保存

中性树胶  10ml|50ml|100ml  100次 真细菌种属鉴定 PCR Mix 2(rDNA) Bacterial DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存

阿拉伯胶水溶液(35%)  100ml  2 ug pALEX c pALEX c 低温运输,-20℃保存

阿拉伯胶水溶液(25%)  100ml  产组胺菌培养基 Histamine producing bacteria Medium 250g

阿拉伯胶水溶液(10%)  100ml  1瓶 SF-295细胞株 SF-295 低温运输和保存

糖浆封片剂  100ml  SS琼脂 Salmonella Shigella Agar 250g

Apathy糖胶封片剂  10ml|50ml  100mg  Dexamethasone 4℃保存

增强型抗荧光淬灭封片剂  5ml|10ml  50T 大肠杆菌(O139)PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

血清封闭剂  50ml  30次 中pH 缓冲液套装 Medium pH Buffer Set 常温保存(5×中pH上样液需要-20℃保存)

碳酸盐缓冲液(0.1mol/L,pH9.2)  500ml  2 ug pYFP-Gogi pYFP-Gogi 低温运输,-20℃保存

 


产品相关关键字: NF-κB 抑制剂
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