操作规程 1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时. 2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。 3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。 4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。 5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。 6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。 7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。 8、结果分析 a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100 b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90) 中文名称:癌细胞增殖抑制剂 英文名称:Berberine chloride hydrate 产品规格:1mL(10mM)|5g 产品货号:BJ-01X7505 Berberine chloride hydrate能有效的抑制多种癌细胞增殖,促进凋亡,能影响MAPK和Wnt/β-catenin通路。 注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途! :141433-60-5 别名:Natural Yellow 18 纯度:99.56% 分子量:389.83 储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1) 准备F-12K培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。 2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。 二. 细胞处理: 1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

细胞培养方法: 1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代 ①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次; ②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化; ③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止; ④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清; ⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基; ⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。 2、细胞复苏: ①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。 ②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。 3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种 ①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶) ②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化; ③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞; ④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。 Enterohemorrhagic E. coli(EHEC)肠出血性大肠杆(大肠埃希氏)O104:H4血清型LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周AKAP5 A激锚定蛋白5抗体 规格: 0.2ml Adenovirus(AV)腺病毒D型探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Phospho-FLT3 (Tyr589/591) 磷酸化FMS样酪激3 规格: 0.1ml Fructus chaenomelis木瓜探针法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周Rabbit anti-mouse IgG-Fc fragment whole serum 兔抗小鼠IgG-Fc段抗清 规格: 1ml 轮状病毒A群/诺如病毒GI/诺如病毒GII三重PCR试剂盒 定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周COX7A2 氧化COX7A2抗体 规格: 0.1ml Ovine Astrovirus 1(OAstV)绵羊星状病毒1型RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周EFHD1 EFHD1蛋白抗体 规格: 0.2ml 豹源性成分PCR检测试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Phospho-p56Dok2(Tyr299) 磷酸化D酪激衰减蛋白2抗体 规格: 0.1ml Cortex dictamni白鲜皮染料法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周Rabbit Anti-pig IgG/AP 碱性磷酸(AP)标记的兔抗猪IgG 规格: 0.1ml Absidia corymbifera伞枝梨头霉LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周phospho-RAD9(Ser380) 磷酸化细胞周期检查控制蛋白质抗体 规格: 0.1ml Avian Leukosis Virus(ALV)禽白血病病毒I亚群探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Rabbit Anti-chicken IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的兔抗鸡IgG 规格: 0.1ml Radix gentianae龙胆探针法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周Syndecan 4 多配体聚糖4抗体 规格: 0.1ml 癌细胞增殖抑制剂HCVRNA复制抑制剂(Sofosbuvir impurity H) 人类环氧化物水解酶抑制剂(Valpromide) PI4KB抑制剂(T-00127_HEV1) HCVRNA复制抑制剂(Sofosbuvir impurity F) β-lactamase抑制剂(AAI101) 肠病毒衣壳抑制剂(Pocapavir) 脂质过氧化抑制剂(Eugenol) 真菌抑制剂(Ravuconazole) 单胺氧化酶和前列腺素合成抑制剂(Amitraz) M2离子通道抑制剂(M2 ion channel blocker) 微生物RnpA抑制剂(RNPA1000)
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