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IKK-2抑制剂(SC-514)
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IKK-2抑制剂(SC-514)公司正在出售的产品:PRLR/Prolactin Receptor 泌素受体抗体 规格: 0.2mlSLC4A4 碳酸钠协同转运蛋白4-A4抗体 规格: 0.1mlHOPX/LAGY 肺相关蛋白Y抗体 规格: 0.2mlBeta-2-MG(B2E5) β2微球蛋白抗体(单抗) 规格: 0.1mlKeratocan 细胞角膜蛋白多糖抗体 规格: 0.2mlG
  IKK-2抑制剂(SC-514)的详细资料:

培养操作步骤

1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;

2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);

3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;

4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;

5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

产品参数:

中文名称

英文名称

产品规格

产品货号

IKK-2抑制剂(SC-514)

SC-514

1mL(10mM)|10mg|50mg

BJ-01X8010

商品详细介绍:

SC-514(GK01140)是IKK-2特异性抑制剂,IC50为11.2uM,对IKK其它亚型或别的丝-苏和酪激酶无抑制性。

注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!

CAS号:354812-17-2

别名:GK 01140

纯度:99.99%

分子量:224.3

储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。

实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

2.png 

实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;

2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;

3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;

4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;

5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点:

1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。

2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。

4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。

5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。

6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

TPPP3 基因全长ORF克隆兔核因子κB受体活化因子配基(RANKL)免疫试剂盒*直销

ST8SIA4 基因全长ORF克隆兔过氧化物体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)免疫试剂盒进口、组装

CHIC2 基因全长ORF克隆兔过氧化物体增殖物激活受体γ(PPARG)免疫试剂盒进口、分装

ARL2BP 基因全长ORF克隆兔过氧化物体增殖物激活受体β(PPARβ)免疫试剂盒现货供应

CCDC28A 基因全长ORF克隆兔过氧化物体增殖物激活受体α(PPARA)免疫试剂盒*直销

KARS 基因全长ORF克隆兔骨桥素(OPN)免疫试剂盒进口、组装

SNX9 基因全长ORF克隆兔骨钙素/骨谷蛋白(OT/BGP)免疫试剂盒进口、分装

ENC1 基因全长ORF克隆兔骨保护素(OPG)免疫试剂盒现货供应

SWAP70 基因全长ORF克隆兔钩端螺旋体IgG(Lep IgG)免疫试剂盒*直销

MSTO1 基因全长ORF克隆兔干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)免疫试剂盒进口、组装

GMEB1 基因全长ORF克隆兔钙结合蛋白(CALB2)免疫试剂盒进口、分装

IKK-2抑制剂(SC-514)G9a抑制剂(UNC0224)  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg  UNC0224沙氏琼脂平板9cm(2~25℃)  9cm*10

B16黑色素瘤/结肠癌38/L1210和白血病P388抑制剂(Bruceantin)  1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg  Bruceantin2 ug pSUPER-GFP-neo pSUPER-GFP-neo 低温运输,-20℃保存

CT-L抑制剂(PI-1840)  1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg  PI-1840SS琼脂颗粒 SS Agar 300ml/袋*10

RARα激动剂(AGN 195183)  2mg  AGN 195183200U 9°Nm DNA聚合 9°Nm DNA Polymerase  -20℃保存

Menin-MLL相互作用抑制剂(MI-3)  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg  MI-3250mL Para-formaldehyde fixative Solution   Para-formaldehyde fixative Solution   常温保存

c-Met/Ron双重抑制剂(MK-8033)  1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg  MK-80335nmol 接头DNA(Hind Ⅲ-Sma I) Adaptors -20℃保存

细胞凋亡激活剂(Apoptosis Activator 2)  1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg  Apoptosis Activator 22 ug pMXB10 pMXB10 低温运输,-20℃保存

蛋白相互作用抑制剂(AI-10-49)  1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg  AI-10-49B5培养基 B5 Medium 250g

PI3Kα,γ和δ抑制剂(PIK-90)  5mg|10mg|50mg|100mg  PIK-901瓶 SW620细胞株 SW620 低温运输和保存

坏死性凋亡抑制剂(Necrostatin 2 S enantiomer)  1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg  Necrostatin 2 S enantiomer葡萄糖半固体培养基 Dextrose Semisolid Medium 250g

RNA polymerase I转录抑制剂(BMH-21)  1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg  BMH-21100mL RNase-Free Potassium Chloride Solution(无RNase的溶液),5M  RNase-Free Potassium Chloride Solution,5M  常温保存

 


产品相关关键字: IKK-2 抑制剂
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