中文名称：微管多聚抑制剂(BNC105)

英文名称：BNC105

产品规格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

产品货号：BJ-01X8273

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备F-12K培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二． 细胞处理：

1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

细胞培养方法：

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

人 NFkB1 基因全长ORF克隆犬CD8分子(CD8)免疫试剂盒现货供应

人 LXN / Latexin 基因全长ORF克隆犬CD6分子(CD6)免疫试剂盒*直销

人 FGF7 / KGF 基因全长ORF克隆犬CD4分子(CD4)免疫试剂盒进口、组装

人 DDR2 Kinase / CD167b 转录变体1 基因全长ORF克隆犬CD31分子(CD31)免疫试剂盒进口、分装

人 LAYN / Layilin 基因全长ORF克隆犬CC趋化因子受体2(CCR2)免疫试剂盒现货供应

人 IGFBP5 基因全长ORF克隆犬B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)免疫试剂盒*直销

人 E-Cadherin 基因全长ORF克隆犬B-淋巴细胞趋化因子1(BLC-1/CXCL13)免疫试剂盒进口、组装

人 ErbB3 / HER3 转录变体1 基因全长ORF克隆犬Bcl-2相关X蛋白(BAX)免疫试剂盒进口、分装

人 CD209 / DC-SIGN 基因全长ORF克隆犬5羟色胺(5-HT)免疫试剂盒现货供应

人 KLK-13 基因全长ORF克隆犬Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)免疫试剂盒*直销

人 JAM-A 基因全长ORF克隆犬Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)免疫试剂盒进口、组装

微管多聚抑制剂(BNC105)血清中的铁含量测定试剂盒(比色法)  50管/48样  serum iron assay kit2mg 辣根过氧化物标记亲和素 HRP-Avidin -20℃保存

亚硝酸盐测定试剂盒(比色法)  100管/96样  nitrite assay kit250mL Sodium Carbonate Solution（钠溶液）,0.5M,pH10   Sodium Carbonate Solution,0.5M,pH10   常温保存

糖化血清蛋白测定试剂盒(果糖胺法)(带标准)  50管/48样|25管/24样  Glycosylated serum protein assay kit1 管 Top肠杆菌 0 E.coli Strain -80℃保存

唾液酸测定试剂盒(带SA标准)(比色法)  50管/48样  Sialic acid assay kit2 ug pSEP1 pSEP1 低温运输，-20℃保存

D-木糖测定试剂盒(比色法)  50管/48样  D-Xylose assay kit50次 柱式土壤RNAout Column Soil RNAOUT 4℃保存

肌酸激酶测定试剂盒(比色法)  50管/24样  Creatine kinase assay kit2 ug pcGlobin2-Cre pcGlobin2-Cre 低温运输，-20℃保存

β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶试剂盒(比色法)  50管/24样  β-N-acetyl-glucosaminidase assay kitISP培养基2 ISP Medium 2 250g

铜蓝蛋白测定试剂盒(测血清，除鸡血清)(比色法)  50管/48样  Ceruloplasmin assay kit25mg 章鱼碱 (+)-Octopine  -20℃保存

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶测定试剂盒(测红细胞)(比色法)  100管/30样  Glucose-6-phosphate dehydrogenase assay kit50T 禽脑脊髓炎病毒PCR检测试剂盒  低温运输，-20℃保存

总氨基酸测定试剂盒(比色法)  80管/78样  Total Amino Acid assay kit1 mg MM1-43（FM®1-43） Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

琥珀酸脱氢酶试剂盒(比色法)  50管/48样  Succinate Dehydrogenase assay kit100mL CAPS Buffer,0.5M,pH9.5  CAPS Buffer,0.5M,pH9.5  常温保存

操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。

8、结果分析

a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)