操作规程 1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时. 2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。 3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。 4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。 5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。 6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。 7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。 8、结果分析 a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100 b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90) 中文名称:JAK2抑制剂(TG101209) 英文名称:TG101209 产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg 产品货号:BJ-01X7996 TG101209是一种选择性的,有效的JAK2抑制剂,IC50值为6nM;同时能抑制Flt3,RET和BRD4的活性,IC50值分别为25nM,17nM和130nM。 注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途! :936091-14-4 纯度:98.94% 分子量:509.67 储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1) 准备F-12K培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。 2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。 二. 细胞处理: 1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

细胞培养方法: 1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代 ①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次; ②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化; ③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止; ④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清; ⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基; ⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。 2、细胞复苏: ①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。 ②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。 3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种 ①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶) ②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化; ③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞; ④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。 人 FKBP9L 基因全长ORF克隆兔子骨涎蛋白(BSP)免疫试剂盒进口、分装 人 TOMM22 基因全长ORF克隆兔子骨胶原交联/Ⅰ型胶原C端肽(Cr/CTX-Ⅰ)免疫试剂盒现货供应 人 HRSP12 基因全长ORF克隆兔子骨胶原交联(Cr)免疫试剂盒*直销 人 CRABP1 基因全长ORF克隆兔子骨碱性(BALP)免疫试剂盒进口、组装 人 EEF1A2 基因全长ORF克隆兔子甘肽还原(GR)免疫试剂盒进口、分装 人 GALK2 基因全长ORF克隆兔子甘肽过氧化(GSH-Px)免疫试剂盒现货供应 人 RRP8 基因全长ORF克隆兔子甘肽(GSH)免疫试剂盒*直销 人 FLI1 基因全长ORF克隆兔子睾酮(T)免疫试剂盒进口、组装 人 TUBG1 基因全长ORF克隆兔子高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)免疫试剂盒进口、分装 人 PAX8 基因全长ORF克隆兔子高密度脂蛋白(HDL-C)免疫试剂盒现货供应 人 TUBB2A 基因全长ORF克隆兔子肝细胞生长因子(HGF)免疫试剂盒*直销 JAK2抑制剂(TG101209)menin和MLL融合蛋白相互作用抑制剂(MI-538) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg MI-5382 ug pSEP2 pSEP2 低温运输,-20℃保存 Mcl1高效抑制剂(Pyridoclax) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg Pyridoclax100mL MAL指示剂培养基 MAL Indicator Medium 常温 ATM/ATR抑制剂(CGK733) 1mL(10mM)|10mg|50mg CGK7332 ug pCI pCI 低温运输,-20℃保存 ABCB1/P-gp/ABCC1/MDR-相关蛋白1抑制剂(Dofequidar fumarate) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg Dofequidar fumarate溶液(20mg) 1ml*5 G9a抑制剂(UNC0646) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg UNC06461g n- 辛基 -β-D- 吡喃葡萄糖苷 n-Octyl-β-D-Glucopyranoside (OGP) -20℃保存 PPM1D抑制剂(CCT007093) 1mL(10mM)|10mg|50mg CCT00709350T 犬布氏杆菌PCR检测试剂盒 低温运输,-20℃保存 B-Raf抑制剂(B-Raf inhibitor 1) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg B-Raf inhibitor 11 mg MM4-64(FM®4-64) Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存 CDC2-like Kinase CLK1/4抑制剂(KH-CB19) 1mL(10mM)|1mg|5mg KH-CB19100mL CAPSO Buffer,0.2M,pH10.0 CAPSO Buffer,0.2M,pH10.0 常温保存 HDAC6抑制剂(Nexturastat A) 1mL(10mM)|1mg|5mg Nexturastat A200mL 电泳级丙烯酰胺溶液(干粉型) Acrylamide Solution(19:1Po`wder),EG 常温 微管多聚抑制剂(BNC105) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg BNC1052 ug pGlue pGlue 低温运输,-20℃保存 TTP22是高亲和力,ATP竞争性酪蛋白激酶2(CK2)抑制剂 1mL(10mM)|10mg|50mg TTP 22100g DNTris Base(三羟甲基氨基甲烷)
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