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Mer磷酸化抑制剂(UNC2250)
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Mer磷酸化抑制剂(UNC2250)公司正在出售的产品:OXSR1 氧化应激反应蛋白1抗体 规格: 0.2mlCCR7/CD197 细胞表面趋化因子受体7抗体 规格: 0.1mlMouse Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的小鼠抗牛IgG 规格: 0.1mlPhospho-PDGF Receptor beta (Tyr1021)
  Mer磷酸化抑制剂(UNC2250)的详细资料:

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Mer磷酸化抑制剂(UNC2250)

UNC2250

1mL(10mM)|5mg|50mg

BJ-01X7856

商品详细介绍:

UNC2250是内源的Mer磷酸化抑制剂,IC50为9.8nM,能阻断配体刺激的EGFR-Mer嵌合蛋白活化。

注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!

CAS号:1493694-70-4

纯度:99.81%

分子量:440.58

储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。

实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

培养操作步骤

1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;

2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);

3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;

4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;

5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
2.png

实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;

2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;

3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;

4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;

5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点:

1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。

2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。

4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。

5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。

6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

穗花杉双黄酮

英文名:   Amentoflavone

英文别名:   Didemethyl-ginkgetin Amentoflavone; 8-(5-(5,7-dihydroxy-4-oxo-4H-chromen-2-yl)-2-hydroxyphenyl)-5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-4H-chromen-4-one

CAS登录号:   1617-53-4

分子式:   C30H18O10

黄杞苷

英文别名:   3-((6-Deoxy-alpha-L-mannopyranosyl)oxy)-2,3-dihydro-5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-4H-1-benzopyran-4-one (2R-trans)

CAS登录号:   572-31-6

分子式:   C21H22O10

分子量:   434.39

8-O-乙酰山栀苷甲酯

英文别名:   Barlerin

CAS登录号:   57420-46-9

分子式:   C19H28O12

分子量:   448.42

山栀苷甲酯

英文别名:   Cyclopenta(C)pyran-4-carboxylic acid, 1-(beta-D-glucopyranosyloxy)-1,4A,5,6,7,7A-hexahydro-5,7-dihydroxy-7-methyl-, methyl ester, (1S-(1alpha,4aalpha,5alpha,7alpha,7aalpha))

CAS登录号:   64421-28-9

分子式:   C17H26O11

分子量:   406.38

京尼平苷酸

英文名:   Geniposidic acid

英文别名:   (1R,2S,6S)-9-(Hydroxymethyl)-2-[(2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-3-oxabicyclo[4.3.0]nona-4,8-diene-5-carboxylic acid

CAS登录号:   27741-01-1

分子式:   C16H22O10

特女贞苷

英文别名:   Nuezhenide 2-(4-Hydroxyphenyl)ethyl-6-(3-ethylidene-2-(beta-D-glucopyranosyloxyl)-3,4-dihydro-5-(methoxycarbonyl)-2H-pyran-4-acetate)-beta-D-glucopyranoside beta-D-Glucopyranoside, 2-(4-hydroxyphenyl)ethyl, 6-(3-ethylidene-2-(beta-D-glucopyranosyloxy)-3,4-dihydro-5-(methoxycarbonyl)-2H-pyran-4-acetate), trans

CAS登录号:   39011-92-2

分子式:   C31H42O17

分子量:   686.62

杨梅苷

英文名:   Myricetrin

英文别名:   3-[(6-deoxy-α-L-mannopyranosyl)oxy]-5,7-dihydroxy-2-(3,4,5-trihydroxyphenyl)-4H-benzopyran-4-one

CAS登录号:   17912-87-7

分子式:   C21H20O12

原阿片碱

英文名:   Protopine

英文别名:   4,6,7,14-Tetrahydro-5-methyl-bis[1,3]benzodioxolo[4,5-c-5',6'-g] azecin-13(5H)-one

CAS登录号:   130-86-9

分子式:   C20H19O5

原儿茶醛

英文名:   3,4-Dihydroxybenzaldehyde

英文别名:   Protocatechuic aldehyde

CAS登录号:   139-85-5

分子式:   C7H6O3

地榆皂苷I

英文名:   Ziyuglycoside I

英文别名:   3-O-alpha-L-Arabinopyranosylpomolic acid beta-D-glucopyranosyl ester;Kudinoside H;Zigu-glucoside I

CAS登录号:   35286-58-9

分子式:   C41H66O13

地榆皂苷II

英文别名:   (3beta)-3-(alpha-L-Arabinopyranosyloxy)-19-hydroxyurs-12-en-28-oic acid;Zigu-glucoside II

CAS登录号:   35286-59-0

分子式:   C35H56O8

分子量:   604.81

Mer磷酸化抑制剂(UNC2250)Hoechst33342染色液(1mg/ml)  1ml|5×1ml  Hoechst33342 Staining Solution(1mg/ml)1nmol EcoR I-Not I-BamH I接头 EcoR I-Not I-BamH I Adaptors -20℃保存

Hoechst33342染色液(含封片剂)  10ml  Hoechst33342 Staining Solution2 ug pMXS-GL (2000 ng) pMXS-GL (2000 ng) 低温运输,-20℃保存

Hoechst33258/PI细胞凋亡染色试剂盒  100T  white培养基 White Medium 250g

Hoechst33342/PI细胞凋亡染色试剂盒  100T  500mL Gelatin Blocking Buffer in PBS with azide   Gelatin Blocking Buffer in PBS with azide   常温保存

碘化丙啶PI染色液(50μg/ml)  10ml  醋酸铅培养基 Lead Acetate Medium 250g

碘化丙啶PI染色液(50μg/ml,含RNase)  10ml  5g 固绿 Fast Green FCF 室温干燥保存

碘化丙啶PI染色液(1mg/ml)  1ml|10×1ml  50T 副鸡嗜血杆菌PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒  50T  100mg 5-溴-4-氯-3-  BCIP -20℃保存

细胞凋亡-Hoechst染色试剂盒  100T  2 ug pBlueScriptR PEX5L pBlueScriptR PEX5L 低温运输,-20℃保存

AO染色液(1mg/ml)  10ml  1.5mL 非RNA清除剂2.0 RNA Erasol 2.0 4℃保存

AO荧光染色试剂盒  100T  2 ug pET-9d pET-9d 低温运输,-20℃保存

 


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