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商品详细介绍：

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

培养操作步骤 ：

1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；

2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；

3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；

4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；

5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；

2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；

3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；

4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；

5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

穗花杉双黄酮

英文名：   Amentoflavone

英文别名：   Didemethyl-ginkgetin Amentoflavone; 8-(5-(5,7-dihydroxy-4-oxo-4H-chromen-2-yl)-2-hydroxyphenyl)-5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-4H-chromen-4-one

CAS登录号：   1617-53-4

分子式：   C30H18O10

黄杞苷

英文别名：   3-((6-Deoxy-alpha-L-mannopyranosyl)oxy)-2,3-dihydro-5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-4H-1-benzopyran-4-one (2R-trans)

CAS登录号：   572-31-6

分子式：   C21H22O10

分子量：   434.39

8-O-乙酰山栀苷甲酯

英文别名：   Barlerin

CAS登录号：   57420-46-9

分子式：   C19H28O12

分子量：   448.42

山栀苷甲酯

英文别名：   Cyclopenta(C)pyran-4-carboxylic acid, 1-(beta-D-glucopyranosyloxy)-1,4A,5,6,7,7A-hexahydro-5,7-dihydroxy-7-methyl-, methyl ester, (1S-(1alpha,4aalpha,5alpha,7alpha,7aalpha))

CAS登录号：   64421-28-9

分子式：   C17H26O11

分子量：   406.38

京尼平苷酸

英文名：   Geniposidic acid

英文别名：   (1R,2S,6S)-9-(Hydroxymethyl)-2-[(2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-3-oxabicyclo[4.3.0]nona-4,8-diene-5-carboxylic acid

CAS登录号：   27741-01-1

分子式：   C16H22O10

特女贞苷

英文别名：   Nuezhenide 2-(4-Hydroxyphenyl)ethyl-6-(3-ethylidene-2-(beta-D-glucopyranosyloxyl)-3,4-dihydro-5-(methoxycarbonyl)-2H-pyran-4-acetate)-beta-D-glucopyranoside beta-D-Glucopyranoside, 2-(4-hydroxyphenyl)ethyl, 6-(3-ethylidene-2-(beta-D-glucopyranosyloxy)-3,4-dihydro-5-(methoxycarbonyl)-2H-pyran-4-acetate), trans

CAS登录号：   39011-92-2

分子式：   C31H42O17

分子量：   686.62

杨梅苷

英文名：   Myricetrin

英文别名：   3-[(6-deoxy-α-L-mannopyranosyl)oxy]-5,7-dihydroxy-2-(3,4,5-trihydroxyphenyl)-4H-benzopyran-4-one

CAS登录号：   17912-87-7

分子式：   C21H20O12

原阿片碱

英文名：   Protopine

英文别名：   4,6,7,14-Tetrahydro-5-methyl-bis[1,3]benzodioxolo[4,5-c-5',6'-g] azecin-13(5H)-one

CAS登录号：   130-86-9

分子式：   C20H19O5

原儿茶醛

英文名：   3,4-Dihydroxybenzaldehyde

英文别名：   Protocatechuic aldehyde

CAS登录号：   139-85-5

分子式：   C7H6O3

地榆皂苷I

英文名：   Ziyuglycoside I

英文别名：   3-O-alpha-L-Arabinopyranosylpomolic acid beta-D-glucopyranosyl ester;Kudinoside H;Zigu-glucoside I

CAS登录号：   35286-58-9

分子式：   C41H66O13

地榆皂苷II

英文别名：   (3beta)-3-(alpha-L-Arabinopyranosyloxy)-19-hydroxyurs-12-en-28-oic acid;Zigu-glucoside II

CAS登录号：   35286-59-0

分子式：   C35H56O8

分子量：   604.81

Mer磷酸化抑制剂(UNC2250)Hoechst33342染色液(1mg/ml)  1ml|5×1ml  Hoechst33342 Staining Solution(1mg/ml)1nmol EcoR I-Not I-BamH I接头 EcoR I-Not I-BamH I Adaptors -20℃保存

Hoechst33342染色液(含封片剂)  10ml  Hoechst33342 Staining Solution2 ug pMXS-GL (2000 ng) pMXS-GL (2000 ng) 低温运输，-20℃保存

Hoechst33258/PI细胞凋亡染色试剂盒  100T  white培养基 White Medium 250g

Hoechst33342/PI细胞凋亡染色试剂盒  100T  500mL Gelatin Blocking Buffer in PBS with azide   Gelatin Blocking Buffer in PBS with azide   常温保存

碘化丙啶PI染色液(50μg/ml)  10ml  醋酸铅培养基 Lead Acetate Medium 250g

碘化丙啶PI染色液(50μg/ml,含RNase)  10ml  5g 固绿 Fast Green FCF 室温干燥保存

碘化丙啶PI染色液(1mg/ml)  1ml|10×1ml  50T 副鸡嗜血杆菌PCR检测试剂盒  低温运输，-20℃保存

细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒  50T  100mg 5-溴-4-氯-3-  BCIP -20℃保存

细胞凋亡-Hoechst染色试剂盒  100T  2 ug pBlueScriptR PEX5L pBlueScriptR PEX5L 低温运输，-20℃保存

AO染色液(1mg/ml)  10ml  1.5mL 非RNA清除剂2.0 RNA Erasol 2.0 4℃保存

AO荧光染色试剂盒  100T  2 ug pET-9d pET-9d 低温运输，-20℃保存