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EGFR激酶抑制剂
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EGFR激酶抑制剂公司正在出售的产品:10管 穿刺培养基 Stab Medium 4℃保存2 ug pPIC 6C pPIC 6C 低温运输,-20℃保存双岐杆菌生化试验无糖对照 20支2 ug pBoBi pBoBi 低温运输,-20℃保存无机磷培养基(不含琼脂)(测磷细菌解磷效能) 250g
  EGFR激酶抑制剂的详细资料:

培养操作步骤

1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;

2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);

3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;

4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;

5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

产品参数:

中文名称

英文名称

产品规格

产品货号

EGFR激酶抑制剂

Erlotinib Hydrochloride

1mL(10mM)|100mg|500mg

BJ-01X7182

商品详细介绍:

英文名称:Erlotinib Hydrochloride

产品规格:1mL(10mM)|100mg|500mg

Erlotinib hydrochloride抑制纯化的EGFR激酶,IC50为2nM。

注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!

CAS号:183319-69-9

别名:CP-358774;OSI-774;NSC 718781

纯度:99.91%

分子量:429.9

储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。

实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

2.png 

实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;

2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;

3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;

4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;

5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点:

1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。

2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。

4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。

5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。

6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

Clostridium spp.梭状芽孢杆属通用探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周SISP1/GI24  应激诱导分泌蛋白1抗体 规格: 0.2mlPMS1  瘤错配修复基因PMS1抗体 规格: 0.1ml

Fructus oryzae germinatus稻芽LAMP鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周CEACAM16/CEAL2  胚抗原相关细胞粘附分子16抗体 规格: 0.2mlBTF/BCLAF1  Bcl2相关转录因子抗体 规格: 0.2ml

Lentivirus通用RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周IL-17E/IL-25  白介素-17E抗体 规格: 0.1mlGCP-2  粒细胞趋化蛋白2抗体 规格: 0.1ml

Bovine Rhinitis B virus (BRBV)牛鼻炎病毒B型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周Defensin β2  防御素β2抗体 规格: 0.1mlNEK2  中心体相关蛋白激Nek2抗体 规格: 0.2ml

Lelystad Virus(LV)染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周AFP  甲胎蛋白AFP抗体 规格: 0.1mlRanBP3  RAN结合蛋白3抗体 规格: 0.2ml

Group A β-hemolytic Streptococcus A组β溶血性链球(A组乙型溶血性链球)PCR试剂盒 定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周Mouse Anti-Bov IgG/FITC  FITC标记的小鼠抗牛IgG 规格: 0.3mlphospho-P53(Ser15)  磷酸化瘤抑制基因P53抗体 规格: 0.1ml

Hepatitis A Virus(HAV)甲型肝炎病毒RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 1-2周GSK-3β (NT)  糖原合激-3β抗体 规格: 0.2mlSox9a  转录因子sox9a抗体 规格: 0.2ml

牛源性成分PCR检测试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周Caspase 4  半胱胺酸蛋白蛋白-4抗体 规格: 0.1mlFAHD2A  延胡索酰乙酰乙酸水解抗体 规格: 0.2ml

Semen lablab album白扁豆染料法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周Donkey Anti-rabbit IgG  驴抗兔IgG 规格: 1mgPhospho-Cyclin B1(Ser147)  磷酸化周期素B1抗体 规格: 0.1ml

Salmonella newport新港沙门氏LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周GAPDH  3-磷酸甘油醛脱(兔来源免疫组化用抗体) 规格: 0.1mlOTUB1  泛素特异性蛋白OTB1抗体 规格: 0.2ml

EGFR激酶抑制剂猴子巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)免疫试剂盒现货供应

小鼠1,4,5-三肌醇(IP3)免疫试剂盒进口、组装

大鼠色羟化(TPH)免疫试剂盒进口、组装

山羊骨碱性(BALP)免疫试剂盒进口、组装

大鼠毒蕈碱型乙酰受体(M-AChR)免疫试剂盒进口、分装

人线粒体呼吸链复合物I 免疫试剂盒现货供应

大象促卵泡素(FSH)免疫试剂盒现货供应

人凝血(Thrombin)免疫试剂盒*直销

亚碲酸盐卵黄增菌液 英文名称: 产品规格:5ml*10

人抗单核细胞抗体(AMA)免疫试剂盒进口、组装

改良马丁液体培养基 英文名称: 产品规格:250ml*20瓶

 


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