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BAY 11-7082(NF-κB抑制剂)
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BAY 11-7082(NF-κB抑制剂)公司正在出售的产品:50次 柱式分枝杆菌DNAout Column Myco DNAOUT 常温2 ug pET-20b(+) pET-20b(+) 低温运输,-20℃保存3%过氧化氢试剂 2ml*20支2 ug pSEP3 pSEP3 低温运输,-20℃保存1台 剪切式匀浆机 常温
  BAY 11-7082(NF-κB抑制剂)的详细资料:

培养操作步骤

1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;

2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);

3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;

4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;

5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

产品参数:

中文名称

英文名称

产品规格

产品货号

BAY 11-7082(NF-κB抑制剂)


2mg

BJ-01X7040

商品详细介绍:

英文名称:

产品规格:2mg

BAY 11-7082是一种常用的NF-κB 抑制剂。BAY 11-7082可以抑制一些细胞因子诱导的IκBα的磷酸化,从而抑制IκBα降解和随后的NF-κB 核转运,终抑制依赖于NF-κB 的基因转录。

BAY 11-7082分子量为207.25,分子式为C10H9NO2S。本产品纯度大于99%。

本BAY 11-7082为进口分装,用无水DMSO 配制,浓度为20mg/ml,共0.1ml。

BAY 11-7082常见使用浓度范围为1-100μM。具体的佳工作浓度请参考相关文献,或根据实验目的,以及所培养的特定细胞和组织,通过实验进行摸索和优化。

注意事项

1.本BAY 11-7082在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。

2.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存:-20℃避光,有效期一年。

实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

2.png 

实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;

2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;

3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;

4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;

5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点:

1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。

2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。

4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。

5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。

6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

Salmonella abortus ovis羊流产沙门氏探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周Donkey Anti-human IgG/PE-Cy3  PE-Cy3标记的驴抗人IgG 规格: 0.1mlCaspase-9  白介素1-β转化样凋亡蛋白6抗体 规格: 0.1ml

Radix aconiti kusnezoffii草乌LAMP鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周SOD1/SOD  超氧化物歧化1抗体(铜/锌过氧化物歧化SOD) 规格: 0.1mlATG4D  自噬相关蛋白4D抗体 规格: 0.2ml

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Amapari virus(AMAV)阿马帕里病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周PAP2c/AP2-gamma  磷脂酸磷酸2C抗体 规格: 0.1mlphospho-Crk p38 (Tyr221)  磷酸化Crk p38抗体 规格: 0.1ml

St.Louis Encephalitis Virus(SLEV)圣路易斯脑炎病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周FbxL12  FBXL12蛋白抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-human IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488标记的兔抗人IgM 规格: 0.1ml

Trichodysplasia Spinulosa Associated Polyomavirus(TSPyV) TS多瘤病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周Sprouty 2  快速发育生因子同源蛋白2抗体 规格: 0.1mlApollon/BIRC6  Apollon凋亡抑制蛋白抗体 规格: 0.2ml

Borrelia recurrentis回归热疏螺旋体(回归热包柔螺旋体)LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周NEEP21  NEEP21蛋白抗体 规格: 0.2mlPatched/PTCH  Patched/PTCH抗体 规格: 0.1ml

Xiphinema cobb剑线虫PCR试剂盒属 植物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周NEK3  丝/苏蛋白激Nek3抗体 规格: 0.2mlSCNN1D/δENaC  上皮钠离子通道蛋白D抗体 规格: 0.2ml

Herba epimedii淫羊藿PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周phospho-Crkl (Tyr207)  磷酸化接蛋白CrkL抗体 规格: 0.1ml

Staphylococcus chromogenes产色葡萄球LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周SHIP1  SH2结构含磷酸肌醇SHIP1抗体 规格: 0.2ml

BAY 11-7082(NF-κB抑制剂)兔子中性粒细胞弹性蛋白(NE)免疫试剂盒现货供应

大鼠黏多糖/糖胺聚糖免疫试剂盒进口、组装

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