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Smo抑制剂(Jervine)
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Smo抑制剂(Jervine)公司正在出售的产品:Phospho-cdc2 (Thr14) 磷酸化周期素依赖激2抗体 规格: 0.1mlPKB/AKT-1 蛋白激B 规格: 0.1mlKLK3/Prostate Specific Antigen 激肽释放3/舒管素3抗体 规格: 0.2mlCDC27/ANAPC3 后期促进复合蛋白3抗体 规格: 0.1mlCPA6 胰羧肽A6抗体 规格:
  Smo抑制剂(Jervine)的详细资料:

操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。

8、结果分析

a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(完全培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)

中文名称:Smo抑制剂(Jervine)

英文名称:Jervine

产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

产品货号:BJ-01X8066

Jervine(11-Ketocyclopamine)是甾体类生物碱,能阻断sonic hedgehog(Shh)信号通路,抑制Smo。

注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!

CAS号:469-59-0

别名:11-Ketocyclopamine

纯度:99.03%

分子量:425.6

储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备F-12K培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。


2.png

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

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LRTM1 基因全长ORF克隆人胃泌素释放多肽(GRP)免疫试剂盒进口、组装

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Smo抑制剂(Jervine)PDE-5抑制剂(Sildenafil)  1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg  Sildenafil100mL TES Buffer,0.2M,pH8.0  TES Buffer,0.2M,pH8.0  常温保存

thrombin抑制剂(Argatroban monohydrate)  1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg  Argatroban monohydrate100µL 小鼠抗E2标签单抗 Anti E2-Tag Mouse MAb -20℃保存

大鼠Nav1.7离子通道抑制剂(ICA-121431)  1mL(10mM)|10mg|50mg  ICA-1214312 ug pTALEN_v2 (NN) pTALEN_v2 (NN) 低温运输,-20℃保存

PDE3抑制剂(Pimobendan)  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg  Pimobendan10g RNDTT (二硫代苏糖醇)  常温

VSMC抑制剂(YS-49)  1mL(10mM)|10mg|50mg  YS-492 ug pDEST32 pDEST32 低温运输,-20℃保存

EL抑制剂(XEN445)  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg  XEN445强化梭菌琼脂 Reinforced Clostridium Agar 250g

5-HT1E/1F受体激动剂(BRL 54443)  1mL(10mM)|10mg|50mg  BRL 5444325g 硫脲 Thiourea 室温保存

ACE抑制剂(Quinapril hydrochloride)  1mL(10mM)|100mg|500mg  Quinapril hydrochloride50T 虾PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

ROCK激酶抑制剂(SAR407899)  1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg  SAR407899100 μg Trichostatin A(HDAC抑制剂) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

ACE抑制剂(Ramipril)  1mL(10mM)|100mg|500mg  Ramipril250mL Glycine Buffer in PBS,0.2M,pH6.5   Glycine Buffer in PBS,0.2M,pH6.5   常温保存

PDE3抑制剂(Olprinone Hydrochloride)  1mL(10mM)|10mg|50mg  Olprinone Hydrochloride1mL 微量双链 DNA 定量试剂盒  -20℃保存

 


产品相关关键字: Smo 抑制剂
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