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mTOR抑制剂(WYE-354)
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mTOR抑制剂(WYE-354)公司正在出售的产品:HER2/NEU/ErbB2 HER2抗体 规格: 0.1mlDAPK3/ZIP Kinase 凋亡相关蛋白激3抗体 规格: 0.1mlRabbit Anti-mouse IgM/PE-Cy7 PE-Cy7标记的兔抗小鼠IgM 规格: 0.1mlCCDC98 卷曲螺旋结构域蛋白98抗体 规格: 0.2mlPANK3 泛酸激3抗体 规格:
  mTOR抑制剂(WYE-354)的详细资料:

操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。

8、结果分析

a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(完全培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)

中文名称:mTOR抑制剂(WYE-354)

英文名称:WYE-354

产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

产品货号:BJ-01X8159

WYE-354是ATP竞争性mTOR抑制剂,IC50为5nM,能阻断mTORC1/P-S6K(T389)和mTORC2/P-AKT(S473),比对PI3Kα和PI3Kγ的抑制性强100倍和500倍。

注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!

CAS号:1062169-56-5

纯度:98.77%

分子量:495.53

储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备F-12K培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。


QQ截图20220509112004.png

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

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CAPZB 基因全长ORF克隆人基质金属蛋白抑制因子2(TIMP-2)免疫试剂盒进口、组装

TUBB 基因全长ORF克隆人基质金属蛋白9/明胶B(MMP-9/Gelatinase B)免疫试剂盒进口、分装

RLN1 基因全长ORF克隆人基质金属蛋白8/中性粒细胞胶原(MMP-8)免疫试剂盒现货供应

RLN2 转录变体1 基因全长ORF克隆人基质金属蛋白7(MMP-7)免疫试剂盒特价直销

SLC30A8 基因全长ORF克隆人基质金属蛋白5(MMP-5)免疫试剂盒进口、组装

BAX 基因全长ORF克隆人基质金属蛋白4(MMP-4)免疫试剂盒进口、分装

MALT1 基因全长ORF克隆人基质金属蛋白3/基质裂解素1(MMP3/STR1)免疫试剂盒现货供应

NLGN1 基因全长ORF克隆人基质金属蛋白25(MMP25)免疫试剂盒特价直销

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HMGA1 基因全长ORF克隆人基质金属蛋白1原(Pro-MMP-1)免疫试剂盒进口、分装

mTOR抑制剂(WYE-354)M1受体激动剂(VU0357017)  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg  VU0357017 hydrochloride100uL 超螺旋DNA分子量标准  

PSD95-nNOS相互作用抑制剂(IC87201)  1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg  IC872012 ug pGL4.10[luc2] pGL4.10[luc2] 低温运输,-20℃保存

MAO-A和MAO-B抑制剂(Paeonol)  1mL(10mM)|250mg|1g  PaeonolBairdParker琼脂基础 BairdParker Agar Medium 250g

单胺氧化酶(MAO)抑制剂(Moclobemide)  1mL(10mM)|50mg|100mg  Moclobemide1瓶 HUV-EC-C细胞株 HUV-EC-C 低温运输和保存

5-HT1B/1D受体激动剂  1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg  Almotriptan malateMIU培养基 MIU Medium 20支/包

GABA A受体激动剂(L-655708)  1mL(10mM)|5mg|10mg  L-6557082000 U 限制性内切XhoI Restriction Endonuclease -20℃保存

脑渗透性JNK抑制剂(SR-3306)  1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg  SR-3306125mL RIPA Buffer with Triton, 2X RIPA Buffer with Triton, 2X 常温保存

Na+电流抑制剂  1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg  Eleclazine hydrochloride1 管 BL21RIL大肠杆菌  

FXR受体激动剂(Fexaramine)  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg  Fexaramine50T 转基因植物NOS基因PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

HIF-PHD抑制剂(FG-2216)  1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg  FG-2216微生物成套生化鉴定管  

IKKβ抑制剂(BI605906)  1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg  BI6059062 ug pcDNA3.1(-)/Myc-His C pcDNA3.1(-)/Myc-His C 低温运输,-20℃保存

 


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