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微管聚合抑制剂
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微管聚合抑制剂公司正在出售的产品:2 ug pRSFDuet-1 pRSFDuet-1 低温运输,-20℃保存50次 天净沙细胞蛋白质-RNA双提取试剂盒 Protein & RNA Extraction Kit 4℃保存2 ug pcDNA6-Myc/His B pcDNA6-Myc/His B 低温运输,-20℃保存酵母浸出物葡萄糖琼脂培养基 Yeast Extract Glucose O
  微管聚合抑制剂的详细资料:

培养操作步骤

1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;

2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);

3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;

4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;

5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

产品参数:

中文名称

英文名称

产品规格

产品货号

微管聚合抑制剂

Vincristine sulfate

1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg

BJ-01X7164

商品详细介绍:

英文名称:Vincristine sulfate

产品规格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg

Vincristine sulfate是一种微管聚合抑制剂,能够与微管蛋白结合,IC50值为32μM。

注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!

CAS号:2068-78-2

别名:Leurocristine sulfate;22-Oxovincaleukoblastine sulfate

纯度:99.51%

分子量:923.04

储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。

实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

2.png 

实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;

2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;

3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;

4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;

5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点:

1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。

2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。

4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。

5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。

6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

Fructus leonuri茺蔚子染料法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周FAM104B  FAM104B蛋白抗体 规格: 0.2ml

Lentivirus通用RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周FEM1A  前列素E受体4相关蛋白抗体 规格: 0.2ml

Bovine Rhinitis B virus (BRBV)牛鼻炎病毒B型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周RECQL5  RecQ解旋样蛋白5抗体 规格: 0.2ml

Menangle Virus梅拉哥病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周Rabbit Anti-horse IgG/RBITC  罗丹明标记的兔抗马IgG 规格: 0.3mlAlpha-ENaC  钠通道蛋白α ENaC 0.2ml

Group A β-hemolytic Streptococcus A组β溶血性链球(A组乙型溶血性链球)LAMP试剂盒 定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周Netrin G2  轴突生诱向因子G2抗体 规格: 0.2mlphospho-YES1(Tyr537)  磷酸化原基因酪蛋白激Yes1抗体 规格: 0.1ml

Hepatitis A Virus(HAV)甲型肝炎病毒RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 1-2周FBXW8/FBXO29  FBXW8蛋白抗体 规格: 0.2mlphospho-NF1(Ser2515)  磷酸化1型神经纤维瘤抗体 规格: 0.1ml

Xylella fastidiosa木质部难养细PCR试剂盒 植物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周phospho-P53(Ser315)  磷酸化瘤抑制基因P53抗体 规格: 0.1mlWASF1/WAVE 1  WAVE1蛋白抗体 规格: 0.2ml

Radix cynanchi atrati白薇染料法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周IKKα(Phospho-Thr23)  磷酸化KB抑制蛋白激α抗体 规格: 0.1mlDonkey Anti-Goat IgG/Cy5.5  Cy5.5标记的驴抗羊IgG 规格: 0.1ml

Salmonella saintpaul圣保罗沙门氏LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周DUSP22/JSP1  双特异性磷酸22抗体 规格: 0.2mlAKAP6  蛋白激A锚定蛋白6抗体 规格: 0.2ml

Cheilospirura hamulosa唇饰带线虫探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周Flightless 1  凝溶胶蛋白家族Fli-1抗体 规格: 0.2mlDEPDC1  细胞周期调控蛋白SDP35抗体 规格: 0.2ml

微管聚合抑制剂液体大豆酪蛋白消化物培养基 英文名称:SoybeanCasein Digest Medium 产品规格:250g

人释放激素(GnRH)免疫试剂盒进口、分装

DNA甲基转移1(DNMT1)免疫试剂盒现货供应

α干扰素(IFN-α)免疫试剂盒现货供应

牛瘦素(LEP)免疫试剂盒进口、分装

小鼠亮脑啡肽(Leu-ENK)免疫试剂盒进口、组装

鸡单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体(HSVⅡ-Ab)免疫试剂盒现货供应

小鼠NADPH氧化1(NOX1)免疫试剂盒进口、分装

大鼠微管蛋白β3(TUBB3)免疫试剂盒进口、分装

兔基质金属蛋白2/明胶A(MMP-2/Gelatinase A)免疫试剂盒进口、组装

 


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