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FAK和ALK双重抑制剂(CEP-37440)
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FAK和ALK双重抑制剂(CEP-37440)公司正在出售的产品:GIRK3/KCNJ9 G蛋白激活内向钾通道3抗体 规格: 0.1mlErbB-3/HER3 表皮生因子受体3抗体 规格: 0.1mlp400 p400蛋白抗体 规格: 0.2mlNR1D1/REV-ERB alpha 细胞核受体Rev-Erbα抗体 规格: 0.2mlHPL/PL 人胎盘泌素抗体 规格: 0.1ml
  FAK和ALK双重抑制剂(CEP-37440)的详细资料:

培养操作步骤

1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;

2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);

3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;

4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;

5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

产品参数:

中文名称

英文名称

产品规格

产品货号

FAK和ALK双重抑制剂(CEP-37440)

CEP-37440

1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

BJ-01X7852

商品详细介绍:

CEP-37440是新型FAK和ALK双重抑制剂,IC50分别为2.3nM和120nM。

注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!

CAS号:1391712-60-9

纯度:99.87%

分子量:580.12

储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。

实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

2.png 

实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;

2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;

3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;

4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;

5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点:

1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。

2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。

4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。

5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。

6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

(R型)原人参二醇

英文别名:   (R)Protopanaxdiol

CAS登录号:   新品待定

分子式:   C30H52O3

分子量:   460

辽东楤木皂苷VII

英文名:   Araloside VII

英文别名:   Congmunoside VII

CAS登录号:   340982-22-1

分子式:   C54H88O24

辽东楤木皂苷X

英文名:   Araloside X

英文别名:   Congmunoside X;3-O-{[β-D-glucopyranosyl(1→2)]-[ β-D-glucopyran osyl(1→3)-β-D-glucopyranosyl(1→3)] β-D-glucopyranosy l}hederagenin 28-O-β-D-glucopyranosyl ester

CAS登录号:   344911-90-6

分子式:   C60H98O28

辽东楤木皂苷V

英文名:   Araloside V

英文别名:   Congmunoside V

CAS登录号:   340963-86-2

分子式:   C54H88O23

白鲜碱

英文名:   Dictamnine

英文别名:   4-Methoxyfuro[2,3-b]quinoline

CAS登录号:   484-29-7

分子式:   C12H9NO2

紫菀酮

英文别名:   2(1H)-Chrysenone,hexadecahydro-1,4b,6a,8,10a,12a-;hexamethyl-8-(4-methyl-3-pentenyl)-,(1R,4aS,4bS,6aS,8R,10aR,10bS,12aS)-;

CAS登录号:   10376-48-4

分子式:   C30H50O

分子量:   426.72

石吊兰甲素

英文名:   Lysionotin

CAS登录号:   152743-19-6

分子式:   C18H16O7

分子量:   344

路路通酸

英文别名:   Betulinonic acid

CAS登录号:   4481-62-3

分子式:   C30H46O3

分子量:   454.69

表木栓醇

英文名:   Epifriedelanol

英文别名:   Friedelin-3β-ol

CAS登录号:   16844-71-6

分子式:   C30H52O

鸭脚树叶碱

英文名:   2α,5α-Epoxy-1,2-dihydroakuammilan-17-oic acid methyl ester

英文别名:   Methyl (2alpha,5alpha,15alpha,16xi,19E)-1,2-dihydro-2,5-epoxyakuammilan-17-oate

CAS登录号:   4684-32-6

分子式:   C20H22N2O3

山柰酚-3-O-芸香糖苷

英文名:   Kaempferol-3-rutinoside

英文别名:   Nicotiflorin

CAS登录号:   17650-84-9

分子式:   C27H30O15

FAK和ALK双重抑制剂(CEP-37440)Rhodamine 123染色液  100T  氯化钠素B肉汤基础(SCPB) Sodium Chloride Polymyxin Broth Base 250g

吖啶橙染色液  100T  100g 盐酸胍 Guanidine Hydrochloride   4℃密封干燥保存

台盼蓝染色液  100T  1%TTC溶液  1ml/支*5

中性红染色液  50ml  1mL 秋水仙素溶液 Colchicine Solution 常温保存

苏木素伊红染色试剂盒  200ml  2 ug pBlueScript SK(-) pBlueScript SK(-) 低温运输,-20℃保存

TRAP染色试剂盒  30T  100g DNCTAB(十六烷基基)  

革兰氏染色试剂盒  200ml  2 ug pGEX-20T pGEX-20T 低温运输,-20℃保存

瑞氏染色试剂盒  100ml|500ml  1%聚酯80-玉米琼脂培养基 1%Tween 80-Corn Agar Medium 250g

姬姆萨染色试剂盒  80ml|700ml  1瓶 CCC-HEK-1细胞株 CCC-HEK-1 低温运输和保存

亚甲基蓝染色试剂盒  100ml  肠球菌显色培养基  1000ml

酸性磷酸酶染色试剂盒  30T  1mL EDTA溶液,0.2M EDTA Solution -20℃保存

 


产品相关关键字: FAK和ALK双重 抑制剂
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