培养操作步骤 ：

1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；

2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；

3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；

4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；

5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

产品参数：

商品详细介绍：

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；

2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；

3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；

4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；

5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

(R型)原人参二醇

英文别名：   (R)Protopanaxdiol

CAS登录号：   新品待定

分子式：   C30H52O3

分子量：   460

辽东楤木皂苷VII

英文名：   Araloside VII

英文别名：   Congmunoside VII

CAS登录号：   340982-22-1

分子式：   C54H88O24

辽东楤木皂苷X

英文名：   Araloside X

英文别名：   Congmunoside X；3-O-{[β-D-glucopyranosyl(1→2)]-[ β-D-glucopyran osyl(1→3)-β-D-glucopyranosyl(1→3)] β-D-glucopyranosy l}hederagenin 28-O-β-D-glucopyranosyl ester

CAS登录号：   344911-90-6

分子式：   C60H98O28

辽东楤木皂苷V

英文名：   Araloside V

英文别名：   Congmunoside V

CAS登录号：   340963-86-2

分子式：   C54H88O23

白鲜碱

英文名：   Dictamnine

英文别名：   4-Methoxyfuro[2,3-b]quinoline

CAS登录号：   484-29-7

分子式：   C12H9NO2

紫菀酮

英文别名：   2(1H)-Chrysenone,hexadecahydro-1,4b,6a,8,10a,12a-;hexamethyl-8-(4-methyl-3-pentenyl)-,(1R,4aS,4bS,6aS,8R,10aR,10bS,12aS)-;

CAS登录号：   10376-48-4

分子式：   C30H50O

分子量：   426.72

石吊兰甲素

英文名：   Lysionotin

CAS登录号：   152743-19-6

分子式：   C18H16O7

分子量：   344

路路通酸

英文别名：   Betulinonic acid

CAS登录号：   4481-62-3

分子式：   C30H46O3

分子量：   454.69

表木栓醇

英文名：   Epifriedelanol

英文别名：   Friedelin-3β-ol

CAS登录号：   16844-71-6

分子式：   C30H52O

鸭脚树叶碱

英文名：   2α,5α-Epoxy-1,2-dihydroakuammilan-17-oic acid methyl ester

英文别名：   Methyl (2alpha,5alpha,15alpha,16xi,19E)-1,2-dihydro-2,5-epoxyakuammilan-17-oate

CAS登录号：   4684-32-6

分子式：   C20H22N2O3

山柰酚-3-O-芸香糖苷

英文名：   Kaempferol-3-rutinoside

英文别名：   Nicotiflorin

CAS登录号：   17650-84-9

分子式：   C27H30O15

FAK和ALK双重抑制剂（CEP-37440）Rhodamine 123染色液  100T  氯化钠素B肉汤基础(SCPB) Sodium Chloride Polymyxin Broth Base 250g

吖啶橙染色液  100T  100g 盐酸胍 Guanidine Hydrochloride   4℃密封干燥保存

台盼蓝染色液  100T  1%TTC溶液  1ml/支*5

中性红染色液  50ml  1mL 秋水仙素溶液 Colchicine Solution 常温保存

苏木素伊红染色试剂盒  200ml  2 ug pBlueScript SK（-） pBlueScript SK（-） 低温运输，-20℃保存

TRAP染色试剂盒  30T  100g DNCTAB(十六烷基基)  

革兰氏染色试剂盒  200ml  2 ug pGEX-20T pGEX-20T 低温运输，-20℃保存

瑞氏染色试剂盒  100ml|500ml  1%聚酯80-玉米琼脂培养基 1%Tween 80-Corn Agar Medium 250g

姬姆萨染色试剂盒  80ml|700ml  1瓶 CCC-HEK-1细胞株 CCC-HEK-1 低温运输和保存

亚甲基蓝染色试剂盒  100ml  肠球菌显色培养基  1000ml

酸性磷酸酶染色试剂盒  30T  1mL EDTA溶液，0.2M EDTA Solution -20℃保存