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GE Ficoll-Paque PLUS淋巴细胞分离液
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GE Ficoll-Paque PLUS淋巴细胞分离液公司正在出售的产品:0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human 85 kDa calcium-independent phospholipase A2 1.56-100 pmol/L ELISA Kit for Human Ficolin-2 0.312-20 ng/mL 人羟化(TH)ELISA试剂盒 78-5000
  GE Ficoll-Paque PLUS淋巴细胞分离液的详细资料:

操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。

8、结果分析

a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(完全培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)

中文名称:GE Ficoll-Paque PLUS淋巴细胞分离液

英文名称:

产品规格:100ml

产品货号:BJ-01X6554

Ficoll-Paque PLUS是经验证可在实验室广泛应用的人淋巴细胞分离液,分离人淋巴细胞用于体外研究。Ficoll-Paque PLUS是一种即开可用的无菌分离液,优化的分离液密度可从周围血液中获得高产率的淋巴细胞,并可以维持B淋巴细胞和T淋巴细胞的生长和分布。低水平内毒素含量(<0.12 EU/ml)。Ficoll-Paque PLUS培养基包含聚蔗糖(Ficoll PM400, 5.7g),二乙酰氨基三碘(9.0g)和乙底酸钙二钠。产品可应用于组织相容性试验,细胞介导免疫检测等。#17-1440-02 Ficoll-Paque PLUS为6瓶装,每瓶100ml。

检测原理:去纤维蛋白或抗凝血剂处理的血液在Ficoll-Paque PLUS分离液中分层,离心分离后,管底部含有聚集的红细胞,红细胞层上面一层含有大量粒性白细胞,而淋巴细胞停留在血浆和Ficoll-Paque PLUS界面处(同时含有沉淀微粒血小板和单核细胞)。回收界面处淋巴细胞,用清洗去除血小板、Ficoll-Paque PLUS分离液和血浆。

保存温度:4-30℃

应用:

细胞分离

产品特性:

物理状态:无色液体

大密度:1.078 g/ml

pH范围:5.5-7.5

内毒素活性:< 0.12 EU/ml

从人周围血液中分离淋巴细胞

保质期:3年

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备F-12K培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。


2.png

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

Vancomycin-Resistant Enterococcus(VRE)耐万古肠球vanA/vanB双重LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Streptococcus mutans变异链球探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Infectious Laryngotracheitis Virus(ILTV)鸡传染性喉气管炎病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Babesia spp.巴贝斯属虫通用LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Semliki Forest Virus(SFV)塞姆利基森林病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

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Tobacco Ringspot Virus(TRSV)烟草环斑病毒RT-PCR试剂盒 植物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Clostridium histolyticum溶组织梭状芽孢杆LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Fasciola magna大拟片形吸虫探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

Hepatitis B Virus(HBV)乙型肝炎病毒D型探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周

GE Ficoll-Paque PLUS淋巴细胞分离液人动力蛋白轻链1,细胞质(DYNLL1/DLC1/DNCL1/DNCLC1/HDLC1)免疫试剂盒现货供应

1%NaCl甘露糖 英文名称: 产品规格:20支

RNA结合蛋白FUS(FUS/TLS)免疫试剂盒特价直销

猪基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)免疫试剂盒特价直销

犬白介素1(IL-1)免疫试剂盒进口、分装

小鼠热休克蛋白27(HSP-27)免疫试剂盒进口、分装

鸡血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)免疫试剂盒特价直销

小鼠白介素2受体β(IL2rb/CD122)免疫试剂盒现货供应

大鼠血红素氧合1(HO-1)免疫试剂盒现货供应

兔子γ干扰素(IFN-γ)免疫试剂盒进口、分装

大鼠碱性(ALP)免疫试剂盒特价直销

 


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