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SMO抑制剂(MK-4101)
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SMO抑制剂(MK-4101)公司正在出售的产品:Goat Anti-Mouse IgG/Gold 胶体金标记的羊抗小鼠IgG 规格: 0.5mlLRP15 富含亮重复序列LRP15抗体 规格: 0.2mlPCDHA4 原钙粘附蛋白α4抗体 规格: 0.2mlSKA2 纺锤体和着丝粒相关蛋白2抗体 规格: 0.2mlmu Opioid receptor µ-型片受体抗体 规格: 0.1m
  SMO抑制剂(MK-4101)的详细资料:

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备F-12K培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

中文名称:SMO抑制剂(MK-4101)

英文名称:MK-4101

产品规格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

产品货号:BJ-01X8563

MK-4101是Hedgehog信号通路中强的SMO抑制剂,能够很好地对抗成神经管细胞瘤和基底细胞癌。

注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!

CAS号:935273-79-3

纯度:98.13%

分子量:493.47

储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。


QQ截图20220509112004.png

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。

8、结果分析

a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(完全培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)

小鼠 CCL20 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签细胞凝血(THROMBIN)活性比色法定量检测试剂盒  20次

小鼠 bFGF 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签组织凝血(THROMBIN)活性比色法定量检测试剂盒  20次

小鼠 bFGF 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签血液凝血(THROMBIN)活性荧光定量检测试剂盒  20次

SIX1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签细胞凝血(THROMBIN)活性荧光定量检测试剂盒  20次

EIF4EBP2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签组织凝血(THROMBIN)活性荧光定量检测试剂盒  20次

SRPX2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签C1-ESTERASE  

HLA-A 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签ACTIVATED PC  

HLA-A 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签LEUCOCYTE ELASTASE  

IL17Rb 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签PLASMIN STREPTOKINASE COMPLEX  

PCSK2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签PROTEIN S  

PGA4 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签PROTHROMBINASE INDUCED CLOTTING TIME;PiCT  

SMO抑制剂(MK-4101)CENPT  着丝粒蛋白T抗体 规格: 0.2ml

phospho-CAMK2G (Ter286)  磷酸化钙/钙调素依赖蛋白激CAMK2G抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-human IgM/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647标记的兔抗人IgM 规格: 0.1ml

OAT-1/SLC22A6  阴离子转运蛋白-1抗体 规格: 0.1ml

HSPβ7/cvHSP  热休克蛋白β7抗体 规格: 0.2ml

PMVK  磷酸甲羟戊酸激抗体 规格: 0.1ml

Mouse Anti-human IgM/PE-CY5  PE-CY5标记的小鼠抗人IgM 规格: 0.1ml

NR2C2/TAK1  孤儿核受体TAK1抗体 0.1ml

Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser167)  磷酸化雌激素受体ER alpha 抗体 规格: 0.1mlCD167b/DDR2  盘状结构域受体蛋白2抗体 规格: 0.2ml

Phospho-SHP2/SHIP2(Tyr81)  磷酸化蛋白酪磷酸2抗体 规格: 0.1ml

Glypican 5  磷脂酰基醇蛋白聚糖-5抗体 规格: 0.2ml

 


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