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Aurora抑制剂(PF-03814735)
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Aurora抑制剂(PF-03814735)公司正在出售的产品:Proteasome 19S 10B 蛋白体PRS10B抗体 规格: 0.2mlPHD1/prolyl hydroxylase 脯氨酰羟化抗体 规格: 0.2mlPhospho-p70 S6 Kinase Beta (Thr228) 磷酸化核糖体S6蛋白激β2抗体 规格: 0.1mlPhospho-Wee1(Ser642) 磷
  Aurora抑制剂(PF-03814735)的详细资料:

培养操作步骤

1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;

2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);

3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;

4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;

5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

产品参数:

中文名称

英文名称

产品规格

产品货号

Aurora抑制剂(PF-03814735)

PF-03814735

1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

BJ-01X7846

商品详细介绍:

PF-03814735是可逆的Aurora抑制剂,对Aurora A,Aurora B,Flt1和FAk的IC50分别为0.8,5,10和22nM。

注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!

CAS号:942487-16-3

纯度:99.24%

分子量:474.48

储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。

实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

2.png 

实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;

2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;

3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;

4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;

5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点:

1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。

2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。

4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。

5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。

6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

瓜子金皂苷己

英文名:   Polygalasaponin F

CAS登录号:   882664-74-6

分子式:   C53H86O23

分子量:   1090.24

柳穿鱼黄素

英文别名:   5,7-dihydroxy-6-methoxy-2-(4-methoxyphenyl)-4-benzopyrone

CAS登录号:   520-12-7

分子式:   C17H14O6

分子量:   314.29

7-乙氧基莫诺苷

英文名:   7-O-ethyl-morroniside

CAS登录号:   新品待定

分子式:   C21H34O11

分子量:   462.49

山茱萸新苷I

英文名:   Cornuside I

英文别名:   Methyl (2R,3S,4R)-3-ethenyl-4-[2-(3,4,5-trihydroxybenzoyl)oxyethyl]-2-[(2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-3,4-dihydro-2H-pyran-5-carboxylate

CAS登录号:   131189-57-6

分子式:   C34H50O20

去乙酰基车叶草苷酸

英文别名:   (1S,4aS,5S,7aS)-1-(b-D-Glucopyranosyloxy)-1,4a,5,7a-tetrahydro-5-hydroxy-7-(hydroxymethyl)cyclopenta[c]pyran-4-carboxylic acid

CAS登录号:   14259-55-3

分子式:   C16H22O11

分子量:   390.34

鞣花酸

英文名:   Ellagic acid

英文别名:   4,3-cde)(1)benzopyran-5,10-dione,2,3,7,8-tetrahydroxy-(1)benzopyrano

CAS登录号:   476-66-4

分子式:   C14H6O8

酯蟾毒配基

英文名:   Resibufogenin

英文别名:   14,15-beta-epoxy-3-beta-hydroxy-5-beta-bufa-20,22-dienolide

CAS登录号:   465-39-4

分子式:   C24H32O4

华蟾毒精

英文名:   Cinobufagin

英文别名:   16-beta)-bet;22-dienolide,16-(acetyloxy)-14,15-epoxy-3-hydroxy-,(3-beta,5-beta,15-bufa-2

CAS登录号:   470-37-1

分子式:   C26H34O6

二十八烷醇

英文名:   Octacosanol

英文别名:   1-Octacosanol, n-Octacosanol

CAS登录号:   557-61-9

分子式:   C28H58O

1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖

英文别名:   1,2,3,4,6-penta-O-galloy-β-D-glucose

CAS登录号:   14937-32-7

分子式:   C41H32O26

分子量:   940.68

小檗胺

英文别名:   (4aS,16aR)-3,4,4a,5,16a,17,18,19-Octahydro-21,22,26-trimethoxy-4,17-dimethyl-16H-1,24:6,9-dietheno-11,15-metheno-2H-pyrido[2',3':17,18][1,11]dioxacycloicosino[2,3,4-ij]isoquinoline-12-ol

CAS登录号:   478-61-5

分子式:   C37H40N2O6

分子量:   608.72

Aurora抑制剂(PF-03814735)细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒  >100次  Senescence β-Galactosidase Staining Kit2 ug pcDNA3.1(+)/GFP Hsp70 pcDNA3.1(+)/GFP Hsp70 低温运输,-20℃保存

溶酶体β-半乳糖苷酶染色试剂盒  >100次  Lysosomal β-Galactosidase Staining Kit马铃薯葡萄糖琼脂(含) Potato Dextrose Agar(Chloramphenicol) 250

细胞膜红色荧光探针(DiI)  10mg  DiIC18(3)50g D-  D-Pantothenic Acid Hemicalcium Salt 4℃避光保存

细胞膜绿色荧光探针(DiO)  10mg  DiOC18(3)气单胞菌培养基基础 Aeromonas Medium Base(Ryan) 250g

内质网红色荧光探针  20μl  Endoplasmic Reticulum Tracker Red5mL 支气道上皮细胞生长因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存

高尔基体红色荧光探针  1mg  Golgi Body Tracker Red100mL Bicine Buffer,0.5M,pH9.0   Bicine Buffer,0.5M,pH9.0   常温保存

溶酶体红色荧光探针  50μl  Lysosome Tracker Red50次 DNA电泳分子量标准(φX174 DNA/Hinc Ⅱ) DNAMETER(3) 4℃保存

线粒体绿色荧光探针  50μg  Mitochondria Tracker Green2 ug pGEX-4T-1-DsRed2 pGEX-4T-1-DsRed2 低温运输,-20℃保存

伊红染色液  100ml  Eosin Staining Solution猪支原体培养基 Pig Mycoplasma Base 250g

中性红染色液(活细胞染色用)  100ml  Neutral Red Staining Solution(Living cell staining)1瓶 GLC-82 [GLC82]细胞株 GLC-82 [GLC82] 低温运输和保存

瑞氏染液  250ml  Bolton肉汤添加剂 Bolton Broth Supplement 1ml/支*5

 


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