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CDK1-cyclinB复合体和GSK-3抑制剂
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CDK1-cyclinB复合体和GSK-3抑制剂公司正在出售的产品:含100ml 缓冲蛋白胨水(BPW)均质袋 Buffered Peptone Water 90ml/袋*10500U Dam 甲基转移 Dam Methyltransferase -20℃保存100mL PIPES Buffer,0.5M, pH7.0 PIPES Buffer,0.5M, pH7.0 常温保存10管 菌种保存
  CDK1-cyclinB复合体和GSK-3抑制剂的详细资料:

中文名称:CDK1-cyclinB复合体和GSK-3抑制剂

英文名称:BIO

产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

产品货号:BJ-01X7443

BIO是一种有效的,选择性的GSK-3和CDK1-cyclinB复合体抑制剂,能够抑制GSK-3αβ/CDK1/CDK5的活性,IC50值分别为5nM/320nM/80nM。

注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!

CAS号:667463-62-9

别名:6BIO;GSK 3 IX;GSK 3 Inhibitor IX;MLS 2052

纯度:98.37%

分子量:356.17

储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备F-12K培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。


QQ截图20220509112004.png

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

Dermanyssus gallinae鸡皮刺螨染料法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周DIS/CCAR1  细胞周期及凋亡调节蛋白1抗体 规格: 0.2mlBARD1  易基因环状结构域蛋白抗体 规格: 0.1ml

腰果源性成分染料法荧光定量PCR试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周HIV p55+NP7  艾滋毒抗体 规格: 0.2mlrhIL-18  8抗体 规格: 0.1ml

Sarcoptes scabiei var(equi)马疥螨探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周Rabbit Anti-Biotin/PE-CY5  PE-CY5标记的兔抗抗体IgG 规格: 0.1ml

Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽传染性支气管炎病毒荷兰株染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周PIK3C3/PI3 kinase type 3  磷脂酰肌醇激3催化亚单位3抗体 规格: 0.1ml

Varicella-Zoster Virus(VZV)水痘-带状疱疹病毒LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周TMEM2L/KIAA1199  跨膜蛋白2样蛋白抗体 规格: 0.2ml

Zaire Ebola Virus(ZEBO)扎伊尔埃博拉病毒RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周Phospho-MEF2A (Thr312)  磷酸化肌细胞增强因子2抗体 规格: 0.1ml

Burkholderia mallei鼻疽伯克霍尔德氏探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周NIFK  KI67相互作用蛋白抗体 规格: 0.2ml

Fructus kochiae地肤子探针法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周RNA polymerase II CTD repeat YSPTSPS (phospho S2)  磷酸化RNA聚合II CTD抗体 规格: 0.1ml

Mouse Leukemia Virus(MLV)小鼠白血病病毒RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周LMW Kininogen/Kininogen 1  低分子量生促进因子抗体(激肽原1) 规格: 0.2ml

Boheliridovirus(BIV)饰纹汀蛙虹彩病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周TSLP  胸基质淋巴细胞生成素-1抗体 0.1ml

CDK1-cyclinB复合体和GSK-3抑制剂ALK抑制剂(HG-14-10-04)

CRF1受体激动剂

PTEN抑制剂

HDAC抑制剂(PTACH)

PI3Kα抑制剂(PI3Kα inhibitor 1)

tyrosine kinase抑制剂(RG13022)

beta-lactamase-IN-1抑制剂(Lp-PLA2 -IN-1)

FLT3抑制剂(FLT3-IN-2)

乙二醛酶I抑制剂(Glyoxalase I inhibitor free base)

GTP结合蛋白Rab7激活剂(ML-098)

Src抑制剂(WEHI-345 analog)

操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。

8、结果分析

a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(完全培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)

 


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