操作规程 1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时. 2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。 3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。 4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。 5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。 6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。 7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。 8、结果分析 a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100 b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90) 中文名称:ERK5抑制剂(ERK5-IN-1) 英文名称:ERK5-IN-1 产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg 产品货号:BJ-01X8054 ERK5-IN-1有效抑制ERK5,EC50为0.19μM,IC50为0.087μM,抑制LRRK2[G2019S]时,IC50为0.026μM。 注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途! :1234479-76-5 纯度:98.62% 分子量:459.54 储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1) 准备F-12K培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。 2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。 二. 细胞处理: 1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

细胞培养方法: 1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代 ①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次; ②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化; ③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止; ④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清; ⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基; ⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。 2、细胞复苏: ①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。 ②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。 3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种 ①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶) ②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化; ③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞; ④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。 人 PNMT 基因全长ORF克隆人血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)免疫试剂盒现货供应 人 SCYL3 基因全长ORF克隆人血管紧张素1-7(Ang1-7)免疫试剂盒*直销 人 PPP1R14D 基因全长ORF克隆人血管活性肠肽(VIP)免疫试剂盒进口、组装 人 LPAL2 基因全长ORF克隆人血管动蛋白(AMOT)免疫试剂盒进口、分装 人 PAN2 基因全长ORF克隆人旋毛虫抗体(Trichinella Ab)免疫试剂盒现货供应 人 UBASH3B 基因全长ORF克隆人溴脱氧核苷(BrdU)免疫试剂盒*直销 人 EIF4B 基因全长ORF克隆人雄烯二酮(ASD)免疫试剂盒进口、组装 人 MSN 基因全长ORF克隆人雄烯二醇免疫试剂盒进口、分装 人 DES 基因全长ORF克隆人雄激素受体(AR)免疫试剂盒现货供应 人 PPP5C 基因全长ORF克隆人胸腺依赖性抗原(TD-Ag)免疫试剂盒*直销 人 SELPLG 基因全长ORF克隆 (密码子优化)人(TP-5)免疫试剂盒进口、组装 ERK5抑制剂(ERK5-IN-1)PGI2受体激动剂(NS-304) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg NS-304梭菌强化培养基 Reinforced medium for clostridia 250g FXa抑制剂(Edoxaban tosylate monohydrate) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg Edoxaban tosylate monohydrate30µg 人培养细胞基因组DNA Human Culture Cell Genomic DNA 4℃保存 血管紧张素转化酶抑制剂(Moexipril hydrochloride) 1mL(10mM)|50mg|100mg Moexipril hydrochloride250mL MES Buffer,1.0M,pH9.0 MES Buffer,1.0M,pH9.0 常温保存 ACE抑制剂(Zofenopril calcium) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg Zofenopril calcium100次 植物种属鉴定PCR Mix 9(质体 trnH-psbA) Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存 Na+/H+交换抑制剂(Cariporide) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg Cariporide2 ug pMAL-p5X pMAL-p5X 低温运输,-20℃保存 脂肪酸代谢抑制剂(Trimetazidine dihydrochloride) 1mL(10mM)|10mg|50mg Trimetazidine dihydrochlorideAHM鉴别培养基 AHM Medium 250g 环氧合酶(COX)抑制剂(Nitroflurbiprofen) 1mg Nitroflurbiprofen1瓶 RKO-E6细胞株 RKO-E6 低温运输和保存 SK channel抑制剂(ICA) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg ICA革兰氏阳性菌增菌液 Gram Positive Bacteria Enrichment Broth 250g 烷基胺Renin抑制剂(VTP-27999 Hydrochloride) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg VTP-27999 Hydrochloride1g 3,3’- 二氨基联苯胺四盐酸 DAB HCl -20℃保存 PDE III抑制剂(Revizinone) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg RevizinoneElek氏培养基 Elek Medium 250g IIA型人重组sPLA2和兔重组cPLA2抑制剂(Tanshinone I) 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg Tanshinone I30次 一站式CTAB-PAGE电泳套装
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