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BRAF抑制剂(Dabrafenib Mesylate)
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BRAF抑制剂(Dabrafenib Mesylate)公司正在出售的产品:4000mL Phosphate Buffered Saline,10X (for blot washing) Phosphate Buffered Saline,10X (for blot washing) 常温保存250g 干粉型SB培养基 SB Medium Powder 常温2 ug pOTB7 STIP1 pOT
  BRAF抑制剂(Dabrafenib Mesylate)的详细资料:

操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。

8、结果分析

a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(完全培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)

中文名称:BRAF抑制剂(Dabrafenib Mesylate)

英文名称:Dabrafenib Mesylate

产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

产品货号:BJ-01X7360

Dabrafenib Mesylate是一种新颖的,高效的,具有选择性的BRAF抑制剂,能够抑制CRAF和BRAFV600E的活性,IC50值分别为5nM和0.6nM。

注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!

CAS号:1195768-06-9

别名:GSK2118436 Mesylate;GSK 2118436B

纯度:99.78%

分子量:615.67

储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备F-12K培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。


2.png

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

Enterohemorrhagic E. coli(EHEC)肠出血性大肠杆O157:H7血清型探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周Cytosine deaminase  胞嘧啶脱氨抗体 0.2mlSIGLEC14  唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素14抗体 规格: 0.2ml

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Xanthomonas hyacinthi风信子黄腐病PCR试剂盒 植物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周KLK11  激肽释放11抗体 规格: 0.1mlIRF3  干扰素调节因子3 规格: 0.1ml

Radix astragali preparata炙黄芪PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周NADE/NGFRAP1  神经生因子受体相关蛋白1抗体 规格: 0.2mlMMS21/NSE2  E3连接MMS21蛋白抗体 规格: 0.2ml

Staphylococcus pseudintermedius伪中间型葡萄球LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周Kv4.3/KCND3  离子通道蛋白Kv4.3抗体 规格: 0.1mlMICS1  生激素诱导跨膜蛋白抗体(真皮源性蛋白2) 规格: 0.2ml

Avian Metapneumovirus(aMPV)禽偏肺病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周FADD  Fas死亡结构域相关蛋白 规格: 0.1mlCobra poison Protein  眼镜蛇蛇毒蛋白抗体 规格: 0.2ml

Pericarpium trichosanthis瓜蒌皮探针法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周NAP1L2  脑特异性蛋白BPX抗体 规格: 0.2mlHepatitis E Virus ORF3   毒抗体 规格: 0.1ml

Brucella bovis牛布鲁氏杆LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周Thymosin Alpha-1/PTMA  胸肽α1抗体 规格: 0.1mlCripto 1 monoclonal (CT)  畸胎瘤衍化生因子单克隆抗体(C端) 规格: 0.1ml

BRAF抑制剂(Dabrafenib Mesylate)单倍体生殖细胞特异性核蛋白激酶Haspin抑制剂(CHR-6494)

topoisomerase抑制剂(Amsacrine)

RSK2抑制剂(FMK)

Raf抑制剂(MLN 2480)

ROCK1和ROCK2小分子抑制剂(RKI-1447)

胸苷磷酸化酶抑制剂(Tipiracil hydrochloride)

CDK抑制剂(PHA-793887)

PI3Ks抑制剂(XL147)

PI4KIIIβ抑制剂(PIK-93)

Aurora B和C抑制剂(GSK1070916)

可逆FAK和Pyk2激酶抑制剂(PF-562271)

 


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