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CDK1抑制剂(Ro-3306)
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CDK1抑制剂(Ro-3306)公司正在出售的产品:50T 乙型脊髓灰质炎病毒PCR检测试剂盒 低温运输,-20℃保存200 mL 小鼠单核细胞分离液1.090 Cell Separation Solution -20℃保存250mL HEPES Buffer,1M,pH9.0 HEPES Buffer,1M,pH9.0 常温保存0.5mL dTTP溶液,100mM dTTP Solutio
  CDK1抑制剂(Ro-3306)的详细资料:

操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。

8、结果分析

a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(完全培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)

中文名称:CDK1抑制剂(Ro-3306)

英文名称:Ro-3306

产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

产品货号:BJ-01X7224

英文名称:Ro-3306

产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

Ro-3306是一种有效的,选择性的CDK1抑制剂,对CDK1,CDK1/cyclin B1和CDK2/cyclin E的Ki值为分别为20nM,35nM和340nM。

注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!

CAS号:872573-93-8

纯度:96.77%

分子量:351.45

储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备F-12K培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。


2.png

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

Abalone Shriveling Syndrome-associated Virus(AbSV)鲍肌肉症病毒LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周phospho-STAT1 (Ser727)  磷酸化信号转导与转录激活因子1抗体 规格: 0.1mlFAM155A  FAM155A蛋白抗体 规格: 0.2ml

Equine Coronavirus(ECoV)马探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周HOXB8  同源盒蛋白B8抗体 规格: 0.2mlLMO2  T淋巴细胞易位蛋白2抗体 规格: 0.2ml

Ganoderma灵芝LAMP鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周EMP3  上皮细胞膜蛋白3抗体 规格: 0.2mlELL2  聚合延伸因子2抗体 规格: 0.2ml

Fowl Adenovirus(FAdV-E)禽腺病毒E型LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周Donkey Anti-Guinea pig IgG/Cy3  Cy3标记的驴抗豚鼠IgG 规格: 0.1mlPhospho-Bad(Ser118)  磷酸化相关死亡促进因子抗体 规格: 0.1ml

Mycoplasma galliscepticum鸡败血支原体探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周phospho-c-Jun(Tyr170)  磷酸化原基因c-Jun抗体 规格: 0.1mlbeta 2 Microglobulin  β2微球蛋白抗体 规格: 0.1ml

Ciborinia camelliae Kohn山茶花腐病PCR试剂盒 植物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周Mouse Anti-human IgG(3D3)/Cy3  Cy3标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 规格: 0.1mlPhospho-HER4 (Tyr1162)  磷酸化HER4抗体 规格: 0.1ml

Vesicular Stomatitis Virus Indiana Serotype(VSV-IND)水泡性口炎病毒印第安纳型染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用) 50次 低温 20度 一年 2-4周CK15  细胞角蛋白15抗体 规格: 0.1mlCYP24A1  细胞色素P450 24A1抗体 规格: 0.2ml

Spring Viraemia of Carp Virus(SVCV)鲤春病毒血症病毒RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周Mast Cell Tryptase  肥大细胞蛋白7抗体 规格: 0.1mlFactor VII light chain  凝因子VII 规格: 0.2ml

Acremonium strictum枝顶孢霉探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周RABGAP1  Rab蛋白GTP激活蛋白1抗体 规格: 0.2mlCOX7A2  氧化VIIA亚型2抗体 0.1ml

Folium nelumbinis荷叶染料法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周Phospho-Insulin Receptor Beta(Tyr1185)  磷酸化胰岛素受体β抗体 规格: 0.1mlCollagen VII  7型胶原抗体 规格: 0.1ml

CDK1抑制剂(Ro-3306)大鼠热休克蛋白70(HSP-70)免疫试剂盒进口、分装

山羊雌激素(E)免疫试剂盒进口、分装

大鼠蛋白激G(PKG)免疫试剂盒现货供应

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营养琼脂斜面 英文名称:Nutrient agar slant 产品规格:250g

人抗TNF-α自身抗体免疫试剂盒进口、分装

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人丁型肝炎IgG(HDV IgG)免疫试剂盒现货供应

硝酸盐肉汤(还原) 英文名称: 产品规格:20支

 

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