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BRafV600E抑制剂(LGX818)
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BRafV600E抑制剂(LGX818)公司正在出售的产品:250mL 考马斯亮蓝染液 Coomassie Blue G-250 Stain Solution 常温保存2 ug pBC-Hygro pBC-Hygro 低温运输,-20℃保存1mg 天然蛋白A Native Protein A -20℃保存2 ug pAAV-hrGFP pAAV-hrGFP 低温运输,-20℃保存GVPC琼脂平板
  BRafV600E抑制剂(LGX818)的详细资料:

操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。

8、结果分析

a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)

中文名称:BRafV600E抑制剂(LGX818)

英文名称:LGX818

产品规格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg

产品货号:BJ-01X7290

英文名称:LGX818

产品规格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg

LGX818是一种可突变体BRafV600E的抑制剂,IC50值为0.3nM,具有良好的抗肿瘤功效。

注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!

CAS号:1269440-17-6

别名:Encorafenib

纯度:99.88%

分子量:540.01

储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备F-12K培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。


2.png

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

Johnson Grass Mosaic Virus(JGMV)*草花叶病毒RT-PCR试剂盒 植物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周NIR1/RDGBA3  膜相关磷脂转运蛋白抗体 规格: 0.2ml

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Human Immunodeficiency Virus 1(HIV-1M-D)人免疫缺陷病毒1型M群D型RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周RAB8  ras基因家族Rab8蛋白抗体(原基因c MEL) 规格: 0.1ml

Ixoides spp.转轮蟹通用探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周Rabbit Anti-Guinea pig IgM/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647标记的兔抗豚鼠IgM 规格: 0.1ml

Folium pyrrosiae石韦染料法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周KLHL10  Kelch样蛋白10抗体 规格: 0.2ml

Trichophyton mentagrophytes须毛癣LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周IL-6R alpha  白细胞介素6受体α抗体IL-6Rα 规格: 0.1ml

Fusarium moniliforme串珠镰刀探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周ERN2  内质网核信号转导蛋白2抗体 规格: 0.2ml

Herba lophatheri淡竹叶LAMP鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周HBA1/Alpha globin/Hemoglobin  红蛋白α1抗体 规格: 0.1ml

Bovine Rotavirus(BRAV)牛轮状病毒通用RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周SLAMF7/CD319  SLAMF7抗体 规格: 0.2ml

Arthrobacter equi马节杆探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周5HTR2C  5-羟色胺受体2C抗体 0.2ml

BRafV600E抑制剂(LGX818)孔雀石绿水溶液(5%)

乳酸酚棉蓝染色液

乳酚油

硝酸盐还原实验试剂

六胺银染色液(改良Grocott-橙黄G法)

六胺银染色液(改良Grocott-苏木素法)

卡氏肺囊虫染色液(改良Lendrum法)

草酸铵结晶紫染色液

地衣红染色液(1%)

地衣红乙醇溶液(1%)

迈格林华染色液(May-Grunwald Stain)

 


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