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c-Met和ALK抑制剂(Crizotinib)
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c-Met和ALK抑制剂(Crizotinib)公司正在出售的产品:250mL PIPES Buffer,1.0M, pH6.5 PIPES Buffer,1.0M, pH6.5 常温保存硫酸 1ml*5支1g 芥子酸 Sinapic Acid 室温干燥保存50T 血吸虫PCR检测试剂盒 低温运输,-20℃保存200 mL 人内皮细胞分离液1.060 Cell Separation Sol
  c-Met和ALK抑制剂(Crizotinib)的详细资料:

操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。

8、结果分析

a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(完全培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)

中文名称:c-Met和ALK抑制剂(Crizotinib)

英文名称:Crizotinib

产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg

产品货号:BJ-01X7141

英文名称:Crizotinib

产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg

Crizotinib是一种有效的c-Met和ALK的抑制剂,IC50值分别为11nM和24nM。

注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!

CAS号:877399-52-5

别名:PF-02341066

纯度:99.97%

分子量:450.34

储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备F-12K培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。


QQ截图20220509112004.png

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

Radix morindae officinalis巴戟天LAMP鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周LCE1A  晚期包膜蛋白1抗体 规格: 0.2ml

Dictyocaulus viviparus牛肺线虫LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周TLR5  Toll样受体5抗体 规格: 0.1ml

Singapore Grouper Iridovirus(SGIV)新加坡石斑鱼虹彩病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周OPGL/RANKL/ODF  骨保护蛋白配体抗体(破骨细胞分化因子) 规格: 0.1ml

Fructus litseae荜澄茄LAMP鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周phospho-GSK3 Alpha/Beta(Tyr279+Tyr216)  磷酸化葡萄糖合成激3α/β抗体 规格: 0.1ml

Flos caryophylli丁香探针法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周SIRT3  线粒体乙酰化3抗体 规格: 0.2ml

Enterovirus(EV)肠道病毒通用RT-LAMP试剂盒,停 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周Goat Anti-Mouse IgG/Cy3  Cy3标记的羊抗小鼠IgG 规格: 0.1ml

Campylobacter spp.弯曲杆探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周Neprilysin 2  脑啡肽2抗体 规格: 0.2ml

Fructus mori桑椹LAMP鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周ZNRF2  锌指/环指蛋白2抗体 规格: 0.2ml

Bovine Cytomegalovirus(BCMV)牛巨  病毒LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周PSAP  鞘脂激活蛋白原抗体 规格: 0.1ml

Rift Valley Fever Virus(RVFV)裂谷热病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周TLR1  Toll样受体1抗体 规格: 0.1ml

c-Met和ALK抑制剂(Crizotinib)兔子酯转移蛋白(CETP)免疫试剂盒*直销

大鼠巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)免疫试剂盒进口、分装

人异质性胞核核糖核蛋白L(hnRNP L)免疫试剂盒现货供应

大鼠P0蛋白抗体(IgG)免疫试剂盒现货供应

人水痘带状疱疹病毒IgM(VZV-IgM)免疫试剂盒*直销

沙氏葡萄糖液体培养基管 英文名称: 产品规格:10ml*20支/包

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DTA培养基 英文名称:Dextrose Tryptone Agar Medium 产品规格:250g

人核因子κB抑制物激β(IKK-β)免疫试剂盒进口、分装

革兰氏染色液试剂盒 英文名称:Gram Staining Kit 产品规格:5ml*8

人表睾酮免疫试剂盒现货供应

 


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