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mTOR抑制剂(WYE-125132)
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mTOR抑制剂(WYE-125132)公司正在出售的产品:CKLFH8/CMTM8 趋化素样因子超家族成员8抗体 规格: 0.2mlADA/Adenosine deaminase 苷脱氨抗体 规格: 0.1mlGlucocorticoid receptor(GR) 糖皮质激素受体抗体 规格: 0.1mlH5N1 Hemagglutinin A型毒H5N1凝集素抗体 规格: 1mlphosp
  mTOR抑制剂(WYE-125132)的详细资料:

操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。

8、结果分析

a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(完全培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)

中文名称:mTOR抑制剂(WYE-125132)

英文名称:WYE-125132

产品规格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

产品货号:BJ-01X8284

WYE-125132是ATP竞争性mTOR选择性抑制剂,IC50为0.19nM,对PI3Ks及其相关的hSMG1和ATR抑制性较弱。

注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!

CAS号:1144068-46-1

纯度:98.39%

分子量:519.6

储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备F-12K培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。


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细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

AGRP 转录变体1 基因全长ORF克隆牛免疫球蛋白A(IgA)免疫试剂盒进口、组装

CPE 基因全长ORF克隆牛卵泡抑素(FST)免疫试剂盒进口、分装

BDNF 转录变体4 基因全长ORF克隆牛烯醇式丙酮酸羧激(PCK)免疫试剂盒现货供应

TLR5 / TIL3 基因全长ORF克隆牛化腺苷酸活化蛋白激(pAMPK)免疫试剂盒*直销

ALK-1 / ACVRL1 转录变体1 基因全长ORF克隆牛果糖激(PFK)免疫试剂盒进口、组装

Cadherin-11 基因全长ORF克隆牛甘油酸酯激2(PGK2)免疫试剂盒进口、分装

BACE1 / ASP2 转录变体a 基因全长ORF克隆牛口蹄疫(FMDV)抗体(IgM)免疫试剂盒现货供应

CA VIII 基因全长ORF克隆牛可溶性CD86(B7-2/sCD86)免疫试剂盒*直销

CD282 / TLR2 基因全长ORF克隆牛可溶性CD8(sCD8)免疫试剂盒进口、组装

CD157 / BST1 基因全长ORF克隆牛免疫试剂盒进口、分装

BCL2L2 / BCL2-like 2 基因全长ORF克隆牛金属硫蛋白(MT)免疫试剂盒现货供应

mTOR抑制剂(WYE-125132)冰冻切片活性氧(ROS)检测试剂盒  200T  100mL D-Hanks溶液 D-Hanks Solution 4℃保存

组织活性氧(ROS)检测试剂盒(DHE)  100T|200T  2 ug pBlueBacHis2 B pBlueBacHis2 B 低温运输,-20℃保存

冰冻切片活性氧(ROS)检测试剂盒(O12)  100T  100mL DNTris HCl,1M,pH7.5  

冰冻切片活性氧(ROS)检测试剂盒(O13)  200T  2 ug pFLAG-CTS pFLAG-CTS 低温运输,-20℃保存

过氧亚硝基阴离子(ONOO-)检测试剂盒  100T|200T  沙门、志贺菌属琼脂培养基(SS)  250g

ROS活性氧抑制剂/ROS清除剂  5ml|10ml  1瓶 COS-1 [COS1]细胞株 COS-1 [COS1] 低温运输和保存

血液亚硝酸盐检测试剂盒(比色法)  100T  EC-MUG培养基 EC-MUG Medium 250g

NAD激酶(NADK)测试盒(微量法)  100管/96样  NAD kinase (NADK) detection kit50000U MMLV逆转录 MMLV Reverse Transcriptase -20℃保存

NAD激酶(NADK)测试盒(可见分光光度法)  50管/48样  NAD kinase (NADK) detection kit250mL Phosphate Buffer,0.5M, pH7.2   Phosphate Buffer,0.5M, pH7.2   常温保存

辅酶ⅠNAD(H)含量测试盒(微量法)  100管/48样  20次 一站式平末端克隆试剂盒 One-Stop Blunt-ended Cloning Kit -20℃保存

辅酶ⅠNAD(H)含量测试盒(可见分光光度法)  50管/24样  2 ug pOTB7 HSPA1A pOTB7 HSPA1A 低温运输,-20℃保存

 


产品相关关键字: mTOR 抑制剂
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