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商品详细介绍：

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

培养操作步骤 ：

1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；

2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；

3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；

4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；

5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；

2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；

3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；

4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；

5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

4补充中2

CAS登录号：   68027-15-6

分子式：   C47H76O17

分子量：   912

分子结构：     

4补充中3

CAS登录号：   848784-87-2

分子式：   C47H76O16

分子量：   896

分子结构：     

Hederacolchiside A1

CAS登录号：   106577-39-3

分子式：   C47H76O16

分子量：   896

分子结构：     

黄花败酱苷C

英文名：   Scabioside C

英文别名：   Leontoside B

CAS登录号：   17233-22-6

分子式：   C41H66O13

白头翁皂苷A3

英文名：   Pulchinenoside A3

英文别名：   (3beta,4alpha)-3-[[2-O-(6-Deoxy-alpha-L-mannopyranosyl)-alpha-L-arabinopyranosyl]oxy]-23-hydroxylup-20(29)-en-28-oic acid;Pulchinenoside A

CAS登录号：   129724-84-1

分子式：   C41H66O12

α-常春藤皂苷

英文名：   α-hederin

英文别名：   (3-beta,4-alpha)-nopyranosyl)oxy)-23-hydroxy;akebiasaponinpd

CAS登录号：   27013-91-8

分子式：   C41H66O12

异佛司可林

英文别名：   6β-Acetoxy-1α,7β,9α-trihydroxy-8,13-epoxy-labd-14-en-11-one

CAS登录号：   64657-21-2

分子式：   C22H34O7

分子量：   410.5

硫酸长春质碱

CAS登录号：   70674-90-7

分子式：   C21H26N2O6S

分子量：   434.51

分子结构：     

环氧泽泻烯

英文别名：   (1S,3aR,4R,8aS)-1,2,3,3a,4,5,6,8a-Octahydro-1,4-dimethyl-7-(1-methylethyl)-1,4-azulenediol

CAS登录号：   87701-68-6

分子式：   C15H26O2

分子量：   238.37

宋果灵

英文名：   Songorine

英文别名：   Napellonine、Zongorine、Bullatine G

CAS登录号：   509-24-0

分子式：   C22H31NO3

五味子酚

英文别名：   5,6,7,8-Tetrahydro-1-acetoxy-2,3,10,11,12-pentamethoxy-6α,7α-dimethyldiben

CAS登录号：   69363-14-0

分子式：   C23H30O6

分子量：   402.5

USP1/UAF1复合体抑制剂(SJB2-043)支原体检测试剂盒  100T-200T  Mycoplasma Detection Kit血琼脂基础2号 Blood Agar Base N0.2 250g

ANNEXIN V- FITC/PI凋亡检测试剂盒  20T|50T||100T  Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit1瓶 LA795(上皮样)细胞株 LA795(上皮样) 低温运输和保存

PI溶液(1mg/ml)  1ml  Propidium Iodide Solution醇麦康凯琼脂基础（SMAC） Sorbitol Maconkey Agar Base 250g

Hoechst 33258 染色液(即用型)  10ml|50mL  Hoechst 33258 Stain solution(ready-to-use)1g 原 Chymotrypsinogen 4℃保存

Hoechst 33342 染色液(即用型)  10ml|50mL  Hoechst 33342 Stain solution(ready-to-use)250mL Stripping Buffer 2,4X  Stripping Buffer 2,4X  常温保存

JC-1线粒体膜电位检测试剂盒  20T|50T|100T  50次 动物线粒体总蛋白提取剂盒  

正常细胞、凋亡细胞与坏死细胞检测试剂盒  100T  2 ug pSIREN-Retro Q pSIREN-Retro Q 低温运输，-20℃保存

细胞存活率检测试剂盒  100T  25次 磁珠法mRNA提取试剂盒  

Hoechst33342/PI双染试剂盒  100T  2 ug pCMV-SPORT6 DNAJC7 pCMV-SPORT6 DNAJC7 低温运输，-20℃保存

AO/EB双染试剂盒  100T  改良Camp-BAP氏琼脂添加剂A Modified Camp-BAP Agar additive A 1ml*5

DAPI染色试剂盒  100T  1g 硫酸盐 Protamine Sulfate Salt 室温干燥保存