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USP1/UAF1复合体抑制剂(SJB2-043)
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USP1/UAF1复合体抑制剂(SJB2-043)公司正在出售的产品:HMBS/PBGD 卟胆原脱氨抗体 规格: 0.2mlphospho-NF1(Ser2817) 磷酸化1型神经纤维瘤抗体 规格: 0.1mlPCDH1 原钙粘附蛋白1抗体 规格: 0.2mlGoat Anti-Mouse IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的羊抗小鼠IgG 规格:
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产品参数:

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USP1/UAF1复合体抑制剂(SJB2-043)

SJB2-043

1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

BJ-01X7838

商品详细介绍:

SJB2-043抑制USP1/UAF1复合体,IC50为544nM。

注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!

CAS号:63388-44-3

纯度:99.30%

分子量:275.26

储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。

实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

培养操作步骤

1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;

2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);

3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;

4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;

5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
2.png

实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;

2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;

3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;

4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;

5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点:

1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。

2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。

4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。

5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。

6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

4补充中2

CAS登录号:   68027-15-6

分子式:   C47H76O17

分子量:   912

分子结构:     

4补充中3

CAS登录号:   848784-87-2

分子式:   C47H76O16

分子量:   896

分子结构:     

Hederacolchiside A1

CAS登录号:   106577-39-3

分子式:   C47H76O16

分子量:   896

分子结构:     

黄花败酱苷C

英文名:   Scabioside C

英文别名:   Leontoside B

CAS登录号:   17233-22-6

分子式:   C41H66O13

白头翁皂苷A3

英文名:   Pulchinenoside A3

英文别名:   (3beta,4alpha)-3-[[2-O-(6-Deoxy-alpha-L-mannopyranosyl)-alpha-L-arabinopyranosyl]oxy]-23-hydroxylup-20(29)-en-28-oic acid;Pulchinenoside A

CAS登录号:   129724-84-1

分子式:   C41H66O12

α-常春藤皂苷

英文名:   α-hederin

英文别名:   (3-beta,4-alpha)-nopyranosyl)oxy)-23-hydroxy;akebiasaponinpd

CAS登录号:   27013-91-8

分子式:   C41H66O12

异佛司可林

英文别名:   6β-Acetoxy-1α,7β,9α-trihydroxy-8,13-epoxy-labd-14-en-11-one

CAS登录号:   64657-21-2

分子式:   C22H34O7

分子量:   410.5

硫酸长春质碱

CAS登录号:   70674-90-7

分子式:   C21H26N2O6S

分子量:   434.51

分子结构:     

环氧泽泻烯

英文别名:   (1S,3aR,4R,8aS)-1,2,3,3a,4,5,6,8a-Octahydro-1,4-dimethyl-7-(1-methylethyl)-1,4-azulenediol

CAS登录号:   87701-68-6

分子式:   C15H26O2

分子量:   238.37

宋果灵

英文名:   Songorine

英文别名:   Napellonine、Zongorine、Bullatine G

CAS登录号:   509-24-0

分子式:   C22H31NO3

五味子酚

英文别名:   5,6,7,8-Tetrahydro-1-acetoxy-2,3,10,11,12-pentamethoxy-6α,7α-dimethyldiben

CAS登录号:   69363-14-0

分子式:   C23H30O6

分子量:   402.5

USP1/UAF1复合体抑制剂(SJB2-043)支原体检测试剂盒  100T-200T  Mycoplasma Detection Kit血琼脂基础2号 Blood Agar Base N0.2 250g

ANNEXIN V- FITC/PI凋亡检测试剂盒  20T|50T||100T  Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit1瓶 LA795(上皮样)细胞株 LA795(上皮样) 低温运输和保存

PI溶液(1mg/ml)  1ml  Propidium Iodide Solution醇麦康凯琼脂基础(SMAC) Sorbitol Maconkey Agar Base 250g

Hoechst 33258 染色液(即用型)  10ml|50mL  Hoechst 33258 Stain solution(ready-to-use)1g 原 Chymotrypsinogen 4℃保存

Hoechst 33342 染色液(即用型)  10ml|50mL  Hoechst 33342 Stain solution(ready-to-use)250mL Stripping Buffer 2,4X  Stripping Buffer 2,4X  常温保存

JC-1线粒体膜电位检测试剂盒  20T|50T|100T  50次 动物线粒体总蛋白提取剂盒  

正常细胞、凋亡细胞与坏死细胞检测试剂盒  100T  2 ug pSIREN-Retro Q pSIREN-Retro Q 低温运输,-20℃保存

细胞存活率检测试剂盒  100T  25次 磁珠法mRNA提取试剂盒  

Hoechst33342/PI双染试剂盒  100T  2 ug pCMV-SPORT6 DNAJC7 pCMV-SPORT6 DNAJC7 低温运输,-20℃保存

AO/EB双染试剂盒  100T  改良Camp-BAP氏琼脂添加剂A Modified Camp-BAP Agar additive A 1ml*5

DAPI染色试剂盒  100T  1g 硫酸盐 Protamine Sulfate Salt 室温干燥保存

 


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