特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。 产品名称 | 辅酶ⅠNAD测试盒100管/48样 | 规格 | 100管/48样 | 检测方法 | 微量法 | 货号 | BJ-01S9510 |
商品介绍:
测定意义 辅酶ⅠNAD(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,NAD+是糖酵解(EMP)和三羧酸循环(TCA)的主要氢受体,生成的NADH经呼吸电子链(ETC)传递把电子交给氧,在合成ATP的同时,形成大量的ROS,同时NADH再生为NAD+。糖、脂、蛋白质三大代谢物质分解中的氧化反应绝大部分通过这一体系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于评价糖酵解和TCA循环的强弱。较高的NAD(H)及NADH/NAD+比值说明细胞呼吸耗氧量较高,处于过氧化状态。此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循环。另外,NAD+降解产物对细胞信号传导、代谢和基因表达等具有重要的调控作用。 测定原理 分别用酸性和碱性提取液提取样品中NAD+和NADH,NADH通过PMS的递氢作用,还原氧化型噻唑蓝(MTT)为甲瓒,在570nm下检测吸光值;而NAD+可被乙醇脱氢酶还原为NADH,进一步采用MTT还原法检测。 需自备的仪器和用品 可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。 |
测定步骤: 1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。 2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。 3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制) 4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。 5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂) 选择抗凝的注意点: ①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致; ②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固; ③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆); ④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。 操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。 7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。 Anti-Angiotensin II receptor 血管紧张素Ⅱ受体抗体 0.2ml Anti-ANGPTL1/ANG-1 血管位蛋白样1/血管生成素样蛋白-1抗体 0.2ml Anti-ANGPTL2/ANG-2 血管位蛋白样2/血管生成素样蛋白-2抗体 0.1ml Anti-ANGPTL4/ANG-4 血管位蛋白样4/血管生成素样蛋白-4抗体 0.2ml Anti-Annexin A 膜粘连蛋白-A抗体 0.2ml Anti-Annexin II 膜粘连蛋白-2抗体 0.2ml Anti-Annexin V 膜粘连蛋白-5抗体 0.1ml Anti-Annexin V 重组膜粘连蛋白-5抗体 0.1ml Anti-AP1 衔接蛋白1抗体 0.2ml Anti-Apaf-1 凋亡蛋白活性因子-1抗体 0.1ml Anti-APC APC活化蛋白C抗体 0.2ml anti-apoD 载脂蛋白D抗体 0.2ml Anti-Apo-E 载脂蛋白E抗体 0.1ml Anti-APP695/770 淀粉样肽前体蛋白抗体 0.1ml Anti-AQP-2 水通道蛋白-2抗体 0.1ml Anti-AQP-3 水通道蛋白-3抗体 0.1ml Anti-AQP4 水通道蛋白-4抗体 0.1ml Anti-AR 雄激素受体抗体 0.1ml Anti-ARC ARC抗体 0.2ml Anti-ARF6 ADP核糖基化因子6抗体 0.2ml Anti-Aromatase P450 芳香化酶/细胞色素P450/P450抗体 0.1ml anti-ARIP2a 激活素受体2A/激活素受体相互作用蛋白2a抗体 0.1ml anti-β-arrestin 1/2 β-抑制蛋白1/2抗体 0.1ml anti-ARIP2B 激活素受体2B/激活素受体相互作用蛋白2b抗体 0.2ml Anti-ART 胶质细胞系源性神经营养因子GDNF的一种抗体 0.1ml Anti-ARα1 α1肾上腺素能受体抗体 0.1ml Anti-ASCL1/MASH1 神经母细胞特异性转移因子抗体 0.1ml anti-ASPP1 p53凋亡刺激蛋白1抗体 0.1ml anti-ASPP2 P53凋亡刺激蛋白2 0.1ml Anti-AT/AGT 血管紧张素原抗体 0.1ml 生长激素2(GH2)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Hormone 2 (GH2) 96T Mus musculus (Mouse) 生长激素2(GH2)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Hormone 2 (GH2) 96T Rattus norvegicus (Rat) 白介素1η(IL1η)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 1 Eta (IL1h) 96T Homo sapiens (Human) 白介素1η(IL1η)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 1 Eta (IL1h) 96T Mus musculus (Mouse) 白介素1η(IL1η)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 1 Eta (IL1h) 96T Rattus norvegicus (Rat) 干扰素ε(IFNε)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Epsilon (IFNe) 96T Homo sapiens (Human) 干扰素ε(IFNε)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Epsilon (IFNe) 96T Mus musculus (Mouse) 干扰素κ(IFNκ)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Kappa (IFNk) 96T Homo sapiens (Human) 干扰素κ(IFNκ)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Kappa (IFNk) 96T Mus musculus (Mouse) 干扰素κ(IFNκ)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Kappa (IFNk) 96T Rattus norvegicus (Rat) EB病毒诱导蛋白3(EBI3)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Epstein Barr Virus Induced Protein 3 (EBI3) 96T Homo sapiens (Human) EB病毒诱导蛋白3(EBI3)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Epstein Barr Virus Induced Protein 3 (EBI3) 96T Mus musculus (Mouse) EB病毒诱导蛋白3(EBI3)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Epstein Barr Virus Induced Protein 3 (EBI3) 96T Rattus norvegicus (Rat) 白介素17C(IL17C)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 17C (IL17C) 96T Homo sapiens (Human) 白介素17C(IL17C)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 17C (IL17C) 96T Mus musculus (Mouse) 白介素17C(IL17C)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 17C (IL17C) 96T Rattus norvegicus (Rat) N-乙酰β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for N-Acetyl Beta-D-Glucosaminidase (NAGase) 96T Homo sapiens (Human) N-乙酰β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for N-Acetyl Beta-D-Glucosaminidase (NAGase) 96T Mus musculus (Mouse) N-乙酰β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for N-Acetyl Beta-D-Glucosaminidase (NAGase) 96T Rattus norvegicus (Rat) 基质金属蛋白酶1(MMP1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Matrix Metalloproteinase 1 (MMP1) 96T Bos taurus; Bovine (Cattle) 辅酶ⅠNAD测试盒100管/48样基质金属蛋白酶1(MMP1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Matrix Metalloproteinase 1 (MMP1) 96T Equus caballus; Equine (Horse) 基质金属蛋白酶1(MMP1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Matrix Metalloproteinase 1 (MMP1) 96T Homo sapiens (Human) 基质金属蛋白酶1(MMP1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Matrix Metalloproteinase 1 (MMP1) 96T Mus musculus (Mouse) 基质金属蛋白酶1(MMP1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Matrix Metalloproteinase 1 (MMP1) 96T Ovis aries; Ovine (Sheep) 基质金属蛋白酶1(MMP1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Matrix Metalloproteinase 1 (MMP1) 96T Rattus norvegicus (Rat)
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