它具有下列特点: 1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。 2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增鲍疱疹样病毒,与其他植物没有交叉反应。 3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。 4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。 5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。 服务流程: 接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。 产品名称 | 英文名称 | 货号 | 支气管败血波氏杆菌LAMP试剂盒 | Lamp kit for Bordetella bronchiseptica | BJ-P987580 |
使用及效果: PCR反应特点 (1) 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为: ①引物与模板DNA特异正确的结合; ②碱基配对原则; ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性; ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。 (2) 灵敏度高 PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。 (3) 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。 (4) 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。 储存条件: 仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。 3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 PCR实验方法步骤: 方法 1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。 2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。 3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。 5ml孟氏假单胞菌Human SCAMP1(Secretory carrier-associated membrane protein 1) ELISA Kit 1g新月弯孢霉Human SKP2(S-phase kinase-associated protein 2) ELISA Kit 1g矮棒曲霉Human SPAG1(Sperm-associated antigen 1) ELISA Kit 5g栗疫菌Human CHID1(Chitinase domain-containing protein 1) ELISA Kit 1g丁香链霉菌Human DUSP1(Dual specificity protein phosphatase 1) ELISA Kit 5g大肠埃希氏菌Human PARP2(Poly [ADP-ribose] polymerase 2) ELISA Kit 1g肠沙门氏菌肠炎亚种Human GPX3(Glutathione peroxidase 3) ELISA Kit 1g脱叶链霉菌Human CTSF(Cathepsin F) ELISA Kit 25g运动发酵单胞菌Human MYBPC3(Myosin-binding protein C, cardiac-type) ELISA Kit 5g亚美尼亚固氮菌Human SCAMP1(Secretory carrier-associated membrane protein 1) ELISA Kit 500mg戊糖乳杆菌Human IKBKG(NF-kappa-B essential modulator) ELISA Kit 250mg根瘤菌Human LMAN1(Protein ERGIC-53) ELISA Kit 1g土壤杆菌属Human LPAR1(Lysophosphatidic acid receptor 1) ELISA Kit 10g加拿大帚霉Human OVOS1(Ovostatin homolog 1) ELISA Kit 25g球毛壳菌Human MTX1(Metaxin-1) ELISA Kit 100mg茶树菇Human LMAN1(Protein ERGIC-53) ELISA Kit 100mg溃疡棒状杆菌Human LPAR1(Lysophosphatidic acid receptor 1) ELISA Kit 支气管败血波氏杆菌LAMP试剂盒ATG7 自噬相关蛋白7抗体加兰他敏吲哚-6-羧酸p27 (cyclin-dependent kinase inhibitor 1B) p27(抗原) ATF4/CREB-2 活化转录因子4抗体炔雌吲哚-6-羧酸P63 protein P63 肿瘤抑制基因(抗原) ATM 毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体炔诺酮吲哚-7-羧酸OPG(Osteoprotegerin) 护骨素(多肽抗原) ATP2c1 钙离子ATP酶通道蛋白抗体4-N-去甲基安乃近吲哚-7-羧酸OPGL (Osteoprotegerin ligand) 骨保护蛋白配体(抗原) phospho-ATM(Ser1981) 磷酸化毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体曲安奈德6-羟基-2-萘甲酸P311 protein 增生性瘢痕相关蛋白(抗原) ATF6 活化转录因子6抗体去乙酰毛花甙(毒)6-羟基-2-萘甲酸PARP(poly ADP-ribose polymerase) 多腺苷二磷酸多聚酶抗原 ATP4B 氢ATP酶通道蛋白抗体乳糖6-羟基-2-萘甲酸Visfatin-1 (PBEF1)(NT) Human 内脂素/内脏脂肪素(人:N端多肽)、内脏脂肪素、 又称:前B细胞克隆增强因子、内肥素、腹脂素 ATP5J ATP5J抗体酞丁安CleviprexVisfatin-1 (PBEF1)(NT) 内脂素/内脏脂肪素 操作步骤: 1:样品准备:取1毫升细胞培养上清(贴壁和悬浮细胞都可以 已培养48小时以上),在16000g离心5分钟,小心弃去上清,避免丢失沉淀(沉淀量有可能很少,目视看不到)。将沉淀用无菌PBS重悬,在16000g离心5分钟,同样小心弃去上清,如此反复用无菌PBS洗三次 将获得的沉淀用100微升超纯水重悬,置于100℃水浴中孵育5分钟。如此制备好的样品可在4℃保存1到2个月。 2:PCR反应的准备: 待各组份融化后先瞬时离心,然后轻弹混匀。按下表在已灭菌的PCR管中配制反应体系,每次实验需加一个阴性和一个阳性对照,测试反应管可以有多个。配制过程中应注意无菌,并注意避免操作产生的气溶胶造成样品间的交叉污染,推荐在有风压的设备如超净台或生物安全柜中进行操作。建议配制完毕后瞬时离心以使液体沉至管底。 |