IL-4的检测生物学及免疫学方法

    1、IL-4与LPS共刺激B细胞分泌IgG1和IgE的测定小鼠B淋巴细胞在LPS刺激下首先分泌IgM和IgG3、IgG2b。当IL-4作用于LPS刺激的B细胞时，IgM、ISC3、IgG2b合成产物明显减少，而IgE、IgCl合成产物显著地增加。在细胞培养5-6d后，收获上清，通过对IgE和IgCl测定，间接了解IL-4的含量。IgE测定用放射免疫法；IgCl含量测定可采用双抗体ELISA夹心法。

    2、依赖株CT．4S的增殖试验  CT．4S细胞是依赖于IL-4，对IL-2低反应的CTLL变异株，其增殖反应(用3H-TdR掺人量来反映)与IL-4呈剂量相关。操作步骤基本同前述用CTLL-2测IL-2，但应设置rIL-2对照，以进一步排除IL-2对结果的影响。

    CT．4S细胞是一类粘附细胞，在收获细胞时，可先用0．25％胰酶消化。CT．4S细胞虽是IL4依赖株，但待测样品中IL-2含量过高(>100U／mL)或IL4含量过高，均影响IL-4测定。因此在进行大批试验时，对待测样品应进行预测，以便将样品稀释至该法zui敏感的检测范围之内。

    3、转染人IL-4受体的CTLL-2细胞测定人IL-4  由于IL-4的种属特异性，人、鼠之间没有交叉反应，故可将人IL-4受体基因转染到IL-2依赖株CTLL-2细胞系中，使这种细胞同时表达小鼠IL-2受体和人IL-4受体，因此，可常规维持在含IL-2的培养基中，并可用于检则重组人IL-4或封闭IL-2活性后的混合样品中的人IL-4活性。

    4、双抗体夹心ELISA法检测诱生上清IL-4含量  以免抗IL-4多克隆抗体包被反应板，以酶标抗IL-4McAb进行夹心ELISA法。与标准晶对比，可测出诱生上清中的IL-4含量，操作步骤同常规ELISA。