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elisa检测试剂盒反应步骤与注意事项
点击次数:568 更新时间:2020-12-16

elisa检测试剂盒实验原理:

将目标抗体包被于微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的目标连接于固相载体上的抗体结合,然后加入微生物化的目标抗体,将未结合的生物素抗体洗净后,加入HRP标记和亲和素,再次*洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。

 

elisa检测试剂盒反应步骤:

(1)严格按照试剂说明书进行操作。操作前将试剂在室温下平衡30~60min。

(2)加样后及时放人孵箱。标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。

(3)封板温育时,各孔一定要封严,防止阳性标本的液体蒸发,产生周边现象从而导致“花板"的出现。 

(4)用洗板机洗板时,保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干:还要防止针口有纤维蛋白或异物,ELISA试剂盒这些异物在洗板的过程中易产生拖带现象而导致“花板"的出现。

(5)合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。

(6)加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。

(7)显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。

(8)加样时保持显色剂不外流;A、B液应避免接触金属器械。加终止液时应避免产生气泡。

(9)应保证酶标板清洁,整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸。以上的措施可以使“花板"降至zui低限度。elisa检测试剂盒从而提高检测的特异性。并得到更准确、可靠的实验结果。

elisa检测试剂盒注意事项:

在收集标本前必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成分是否足够稳定,我们提倡新鲜标本尽早检测,对收集后当天就进行检测的标本,请及时储存在4℃的条件下备用,如有特殊原因需要周期收集标本,请在造模取材后,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保持。因冰室与室温存在一定的温差,蛋白极易降解,直接影响实验质量,所以请避免反复冻融。有代测需求的客户,取材前请务必和我司销售人员索要说明书,具体操作事项请与我司技术人员保持沟通。

 

联系人:王经理
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