细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备F-12K培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二． 细胞处理：

1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

中文名称：髓鞘染色液(变色酸2R法)

英文名称：

产品规格：4×50ml

产品货号：BJ-01X6857

细胞培养方法：

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。

8、结果分析

a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)

Rhizoma arisaematis天南星染料法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周HMGB4  高迁移率族蛋白B4抗体 规格: 0.1mlVisfatin-1(CT)  内脂素/内脏脂肪素(C端抗体) 0.1ml

Ranavirus蛙病毒LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周IL-1 Beta/IL-1B  白介素1β抗体 规格: 0.1mlProteasome 20S alpha 3  蛋白体PSMα3抗体 规格: 0.2ml

West Nile Virus(WNV)西尼罗病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Rabbit Anti-horse IgG/HRP  辣根过氧化物标记的兔抗马IgG 规格: 0.1mlCWF19L1  CWF19L1蛋白抗体 规格: 0.2ml

Radix paeoniae rubra赤芍LAMP鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周CCR-2/CD192  细胞表面趋化因子受体2抗体 规格: 0.1mlKLHL21  Kelch样蛋白21抗体 规格: 0.2ml

Nosema spp.蜜蜂微孢子虫通用LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周NOL1  增相关核仁抗原抗体 规格: 0.2mlIL-32/NK4  白介素32抗体 规格: 0.1ml

Mycobacterium avian禽结核分枝杆探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周CD45/B220  白细胞共同抗原抗体 规格: 0.1mlH3-K4-HMTase SETD7  组蛋白H4-K4甲基转移抗体 规格: 0.2ml

Enteric Cytopathic Human Orphan Virus(ECHO)肠道致  病变人孤儿病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周phospho-VEGFR2 (Tyr1175)  磷酸化管内皮生因子受体2抗体 规格: 0.1mlRabbit Anti-Guinea pig IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350标记的兔抗豚鼠IgM 规格: 0.1ml

Goose Astrovirus（GAstV）鹅星状病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周phospho-Proteasome 20S beta 7(Ser214)  磷酸化蛋白体PSMβ7抗体 规格: 0.2mlCRMP5  二嘧啶相关蛋白5抗体 规格: 0.2ml

Influenza Virus A甲型流感（）病毒H1亚型RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周ADORA1  苷A1A受体抗体 0.2mlKLH  蓝蛋白抗体 规格: 0.1ml

小鼠源性成分PCR检测试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周CNTF  睫状神经营养因子抗体 规格: 0.1mlLANCL2  G蛋白偶联受体69B 规格: 0.2ml

髓鞘染色液(变色酸2R法)人酸性神经鞘磷脂(ASM)免疫试剂盒*直销

乳糖蛋白胨培养液（含小倒管） 英文名称：Lactose Peptone Broth 产品规格：10ml*20支/包

人类固醇细胞抗体(SCA)免疫试剂盒进口、组装

麦芽汁培养基 英文名称：Malt Extract Medium 产品规格：250g

人蛔虫抗体(IgM)免疫试剂盒进口、分装

酸性L-G培养基基础 英文名称：Acid L-G Medium Base 产品规格：250g

人补体1抑制物抗体-IgG(C1INH-IgG)免疫试剂盒现货供应

： 66-84-2 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

人blca-1 免疫试剂盒*直销

小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)免疫试剂盒进口、组装

牛胱天蛋白6(Casp-6)免疫试剂盒现货供应