中文名称：细胞膜染色试剂盒(PKH67) 英文名称： 产品规格：500T 产品货号：BJ-01X6673 荧光染料PKH67 是一种可对活细胞进行荧光标记的新型染料，可以标记活体细胞，通过与膜结构的脂质分子结合而标记细胞。 PKH67对细胞毒性较小，荧光背景低，脂溶性高，能够轻易穿透细胞膜，有着强而稳定的绿色荧光。经PKH67标记的细胞可用于体外和体内增殖研究，且具有不会使邻近细胞染色的功能。 在细胞分裂增殖过程中，PKH67 的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减，标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，因此其荧光强度是亲代细胞的一半，根据这一特性，它可被用于检测细胞增殖，细胞周期的估算及细胞分裂等方面。PKH67标记细胞的荧光非常均一，并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均一。在细胞分裂增殖过程中，PKH67标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，荧光强度变为亲代细胞的一半，通过流式细胞仪根据荧光强度的不同，可检测出未分裂细胞，分裂一次(1/2 的荧光强度)，二次(1/4 的荧光强度)，三次(1/8 的荧光强度)，以及更多分裂次数的细胞。PKH67 可检测分裂次数多达六次甚至更多。 除了用于细胞增殖检测，PKH67 还可以用于细胞的体外盒体内示踪，标记后荧光在胞内表达稳定，阳性标记率达98%以上，标记细胞形态良好，能有效地观察细胞在体外的诱导分化情况；或将标记的细胞注入体内，可以有效的显示移植细胞在活体组织中的迁移及分化。 PKH67标记的细胞用于体内观察可以长达数周之久，它常被用来做活体细胞检测实验和用荧光电镜观察细胞长期活动的实验。PKH67 毒性较小，不影响细胞的增殖能力。此方法操作简单，且不用放射性同位素，不存在安全隐患。可以更快速，更准确和更安全地得到想要的实验数据。 PKH67标记细胞后通常用流式细胞仪进行细胞增殖检测。 PKH67标记细胞呈绿色荧光，荧光波长：λex=490 nm,λem=502 nm。 储存条件：-20℃避光保存。 |
细胞培养操作规程： 一．培养基及培养冻存条件准备： 1） 准备F-12K培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。 2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。 3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。 二． 细胞处理： 1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
细胞培养方法： 1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代 ①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次； ②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化； ③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止； ④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清； ⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基； ⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。 2、细胞复苏： ①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。 ②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。 3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种 ①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶） ②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化； ③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞； ④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。 500mL Tris-HCl Buffer,1.0M,pH7.0 Tris-HCl Buffer,1.0M,pH7.0 常温保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Calcium/calmodulin-dependent protein kinase kinase 2 1 mg Fluo-3，五铵盐 Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存 31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Lymphotoxin-alpha 100次 活性氧检测试剂盒 Oxidative Stress Detection Kit 常温保存 0.312-20 nmol/mL 人氧鲨烯环化(OSC)ELISA试剂盒 2 ug pET-11a pET-11a 低温运输，-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Phosphoenolpyruvate carboxykinase [GTP], mitochondrial 250mL Succinate Buffer（琥珀酸缓冲液）,0.2M,pH6.5 Succinate Buffer,0.2M,pH6.5 常温保存改良盐缓冲液PSB 进口、国产Phosphate Saline Buffer,Modified用于小肠结肠炎耶尔森氏菌冷增菌培养 （GB标准）250 25mg 多聚 -L- 赖 (7-15 万 ) Poly-L-Lysine -20℃保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Leukotriene C4 synthase RSMA培养基 250g 0.156-10 ng/mL 人PSTK ELISA试剂盒 30次 高pH 缓冲液套装 High pH Buffer Set 常温保存（5×高pH上样液需要-20℃保存） 250mL PIPES Buffer，1.0M, pH6.0 PIPES Buffer，1.0M, pH6.0 常温保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Transcription factor RelB 50T (OC43/HKU1)PCR检测试剂盒 低温运输，-20℃保存 0.39-25 ng/mL ELISA Kit for Human Somatoliberin 1瓶 ZM755株 ZM755 低温运输和保存噻孢 A进口、国产添加于100ml HB0121中1.25μg/支*5 细胞膜染色试剂盒(PKH67)大鼠CDP-甘油二酯--甘油-3-3磷脂酰转移,线粒体(PGS1)免疫试剂盒进口、分装 人神经细胞粘附分子配体1(NCAM-L1/CD171)免疫试剂盒现货供应 mEC肉汤 英文名称：mE.Coli Broth 产品规格：250g 人柯萨奇病毒(Cox V)抗体(IgM)免疫试剂盒*直销 葡萄糖酪胨琼脂 英文名称：Dextrose Casein-peptone Agar 产品规格：250g 人瓜免疫试剂盒进口、组装 Letheen肉汤 英文名称：Letheen Broth 产品规格：250g 人白介素5(IL-5)免疫试剂盒进口、分装 远志酸 ： 22338-71-2 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询 人20S蛋白体(20SP)免疫试剂盒现货供应 小鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)免疫试剂盒*直销 操作规程 1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时. 2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。 3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。 4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。 5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。 6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。 7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。 8、结果分析 a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100 b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
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