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MEK抑制剂(Trametinib)
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MEK抑制剂(Trametinib)公司正在出售的产品:2 ug pLAPSN pLAPSN 低温运输,-20℃保存250mL 消化液(无EDTA) Trypsin Solution -20℃保存1瓶 MDBK细胞株 MDBK 低温运输和保存品红亚琼脂 Fuchsin Basic Sodium Sulfite Agar 250g1mg 乙酰辅 A Acetyl Coenzyme A -20℃保存
  MEK抑制剂(Trametinib)的详细资料:

培养操作步骤

1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;

2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);

3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;

4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;

5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

产品参数:

中文名称

英文名称

产品规格

产品货号

MEK抑制剂(Trametinib)

Trametinib

1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg

BJ-01X7064

商品详细介绍:

英文名称:Trametinib

产品规格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg

Trametinib是一种有效的MEK抑制剂,特别抑制MEK1/2的活性,IC50值约为2nM。

注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!

CAS号:871700-17-3

别名:GSK1120212;JTP-74057

纯度:99.37%

分子量:615.39

储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。

实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

2.png 

实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;

2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;

3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;

4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;

5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点:

1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。

2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。

4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。

5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。

6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

Seman platycladi柏子仁探针法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周Mouse Anti-Bov IgG/Cy5  Cy5标记的小鼠抗牛IgG 规格: 0.1mlANGPT3/ANG3/ANGPT4/ANG4  管生成素3/管生成素4抗体 规格: 0.1ml

Eurytrema pancreaticum胰阔圆盘吸虫LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周FMDV Polyprotein (VPg2 protein)  口蹄疫毒A型抗体 规格: 0.2mlphospho-MEF2C(Ser396)  磷酸化肌细胞增强因子2C抗体 规格: 0.1ml

Jamestown Canyon Virus (JCV)詹姆士城峡谷病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周PRKAG2/AMPKγ2  苷单磷酸活化蛋白激γ2抗体 规格: 0.2mlEphB1+EphB2  酪蛋白激受体B1+B2抗体 规格: 0.2ml

Rhizoma phragmitis芦根LAMP鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周SIRT1/sirtuin 1  沉默调节蛋白1抗体 0.1mlphospho-GATA-4(ser 262)  磷酸化GATA结合蛋白4抗体 规格: 0.1ml

Human Polyomavirus 6 (HPyV6)人多瘤病毒6 LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周Phospho-MAP2(Ser136)  磷酸化微管相关蛋白2抗体 规格: 0.1mlSLC25A20  线粒体二羧酸载体蛋白20抗体 0.1ml

Mycoplasma hominis人支原体探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周C22orf31  22号染色体开放阅读框31抗体 规格: 0.2mlASTE1  ASTE1蛋白抗体 规格: 0.2ml

Clavibacter michiganensis ssp. michiganensis番茄溃疡病PCR试剂盒 植物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周Gax  生终止特异性同源盒基因抗体 规格: 0.2mlC17orf82  17号染色体开放阅读框82抗体 规格: 0.2ml

Classical Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus(C-PRRSV)猪生殖与呼吸综合症病毒美洲型经典株探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用) 50次 低温 20度 一年 2-4周HSPA6  热休克蛋白70家族蛋白6抗体 规格: 0.2mlDonkey Anti-Guinea pig IgG/Cy5  Cy5标记的驴抗豚鼠IgG 规格: 0.1ml

Cupixi virus(CPXV)库皮科斯病毒RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周Rabbit Anti-Mink IgG/PE-Cy3  PE-Cy3标记的兔抗水貂IgG 规格: 0.1mlTransketolase(CT)  转酮醇(转羟乙醛)抗体(C端) 规格: 1ml

Penicillium spp.青霉通用探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周Ube2L3  泛素蛋白连接L3抗体 规格: 0.2mlCLLD7  核苷酸交换因子CLLD7抗体 规格: 0.2ml

MEK抑制剂(Trametinib)60S核糖体蛋白L36a-样(RPL36AL)免疫试剂盒*直销

小鼠乙型肝炎表面抗原(HBsAg)免疫试剂盒进口、组装

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豚鼠孕激素(progestogen)免疫试剂盒*直销

大鼠乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)免疫试剂盒现货供应

山羊睾酮(T)免疫试剂盒现货供应

大鼠淀粉样前体蛋白(βAPP)免疫试剂盒*直销

α链(FGA)免疫试剂盒进口、组装

植物E(VE)免疫试剂盒进口、分装

 


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