培养操作步骤 ： 1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中； 5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 产品参数： 中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 产品货号 | 吉姆萨染色液 | Giemsa Stain Solution | 100ml | BJ-01X6582 |
商品详细介绍： 本品以进口的吉姆萨色素、甲醇为主要原料，含*衬染剂，经研磨配制而成，能呈现出清晰的细胞染色效果。经常用于组织切片、血液和细胞涂片、细菌、染色体显带、原生动物寄生虫等染色。吉姆萨染色液由吉姆萨贮存液(10×)和磷酸盐缓冲液组成，10×贮存液可以单独使用，也可以1:9混合成工作液后使用。 吉姆萨色素是由天青Ⅱ与伊红混合而成。吉姆萨染色原理和结果与瑞氏染色基本相同，吉姆萨染色液对胞浆着色力较强，能较好的显示胞浆的嗜碱性程度，特别是对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒，着色清晰，但是对细胞核着色偏深,核结构显色不佳，故吉姆萨染液常与瑞氏染液联合使用。 一、一步法涂片染色 1、吉姆萨工作液的配制： 按吉姆萨贮存液(10×):磷酸盐缓冲液=1:9混合，即取1份吉姆萨储存液(10×)加入到9份的磷酸盐缓冲液中充分混匀，即为吉姆萨工作液，该工作液为即用型试剂，不易保存，即用即配。 2、常规方法制备血液涂片或骨髓涂片，待涂片自然干燥后，用甲醇固定1-3分钟。 3、将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上，滴加吉姆萨工作液覆盖涂片，室温滴染。 4、用自来水或蒸馏水缓慢从玻片一端冲洗。 5、干燥、镜检。 6、染色结果： 嗜酸性颗粒————粉红色； 嗜碱性颗粒————紫蓝色； 中性颗粒—————淡紫色 二、两步法涂片染色 1、吉姆萨工作液的配制： 按吉姆萨贮存液(10×):蒸馏水=1:4混合，即取1份的吉姆萨贮存液(10×)加入到4份的蒸馏水中充分混匀，即为吉姆萨工作液。吉姆萨工作液为即用型试剂，不易保存，即用即配。 2、常规方法制备血液涂片或骨髓涂片，待涂片自然干燥后，用甲醇固定。 3、将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上，滴加适量吉姆萨工作液覆盖涂片，室温滴染。 4、加入等量磷酸盐缓冲液，轻轻晃动载玻片，室温静置。 5、用自来水或蒸馏水缓慢从玻片一端冲洗。 |
实验报告： 一、分离与培养： 1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小； 2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置； 3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化； 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养； 5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养； 二、免疫荧光鉴定： 1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min； 2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min； 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜； 5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h； 6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 
实验要点及说明： 1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法； 2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理； 3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。 操作要点： 1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。 2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。 3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。 4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。 5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。 6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。 Cheilospirura hamulosa唇饰带线虫LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 Nocardia transvalensis南非诺卡探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 Human Immunodeficiency Virus 1(HIV-1O)人免疫缺陷病毒1型O群RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 Chicken Embro Lethal Orphan Virus(CELOV)鸡胚致死孤儿病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 Xanthomonas campestris pv. alfalfae野油菜黄单胞苜蓿致病变种PCR试剂盒 植物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 Bovine Enterovirus(BEV)牛肠道病毒RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 Human Parainfluenza Virus 3(HPIV-3)人副流感病毒3型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 Trichophyton equinum马毛癣LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 Penicillium marneffei马内菲青霉探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 Sanguis draxonis血竭LAMP鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周 火鸡源性成分PCR检测试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 Helminthosporium solani马铃薯银屑病PCR试剂盒 植物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 吉姆萨染色液山羊转化生长因子β2(TGF-β2)免疫试剂盒现货供应 大鼠钙激活中性蛋白1(CAPN1)免疫试剂盒*直销 人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)免疫试剂盒进口、组装 鹿次黄氧化免疫试剂盒进口、分装 人前胶原C内肽增强子1(PCOLCE1)免疫试剂盒进口、分装 肉浸液肉汤培养基 英文名称：Meat Infusion Broth 产品规格：250g 人抗角蛋白丝聚集素/丝集蛋白抗体(AFA)免疫试剂盒现货供应 3%过氧化氢试剂 英文名称： 产品规格：2ml*20支 人肺炎衣原体抗体IgA(Cpn-IgA)免疫试剂盒*直销 特殊蛋白胨 英文名称：Peptone Special 产品规格：250g 人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)免疫试剂盒进口、组装
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