操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。

8、结果分析

a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)

中文名称：标准革兰氏染色液

英文名称：

产品规格：4×10ml|4×100ml|4×250ml|4×500ml

产品货号：BJ-01X6899

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备F-12K培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二． 细胞处理：

1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

细胞培养方法：

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

Pseudomonas aeruginosa绿脓假单胞探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周PROK2/Prokineticin 2  前动力蛋白2抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-mouse IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488标记的兔抗小鼠IgM 规格: 0.1ml

Herba scutellariae barbatae半枝莲探针法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周Rabbit Anti-human IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5标记的兔抗人IgG 规格: 0.1mlTrk B/NTRK2  酪激B抗体 规格: 0.1ml

Arachnia propionica丙酸蛛网LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周phospho-ATG7(Ser95)  磷酸化自噬相关蛋白7抗体 规格: 0.1mlINPPL1  肌醇聚磷酸盐磷酸样蛋白1抗体 规格: 0.2ml

Parascaris equorum马蛔虫探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Mouse Anti-human IgM/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5标记的小鼠抗人IgM 规格: 0.1mlEndomucin  内皮粘蛋白EMCN抗体 规格: 0.2ml

Herba portulacae马齿苋LAMP鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周SCP3  联会复合体蛋白3抗体 规格: 0.1mlRabbit Anti-Mink IgG/APC  APC标记的兔抗水貂IgG 规格: 0.1ml

Human Parainfluenza Virus 2(HPIV-2)人副流感病毒2型RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Proteasome 19S 10B  蛋白体PRS10B抗体 规格: 0.2mlPHD1/prolyl hydroxylase  脯氨酰羟化抗体 规格: 0.2ml

Arthrinium spp.节菱孢霉属通用探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Phospho-p70 S6 Kinase Beta (Thr228)  磷酸化核糖体S6蛋白激β2抗体 规格: 0.1mlPhospho-Wee1(Ser642)  磷酸化WEE1蛋白抗体 规格: 0.1ml

Clobodera rostochiensis马薯金线虫PCR试剂盒PCR试剂盒 植物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Plzf  早幼粒细胞白锌指蛋白抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-Bovine IgM/HRP  辣根过氧化物标记的兔抗牛IgM 规格: 0.1ml

NADC30-like Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus(NADC30-like PRRSV)猪生殖与呼吸综合症病毒美洲型NADC33株RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用） 50次 低温 负20度 一年 2-4周phospho-PP2A alpha(Tyr307)  磷酸化蛋酸2A（PP2Aα）抗体 规格: 0.1mlHistone H2A.Z/ H2AFZ  组蛋白H2AZ抗体 规格: 0.2ml

Leishmania infantum婴儿利什曼虫LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Phospho-FoxO1 (Ser319)  磷酸化叉蛋白家族1抗体 规格: 0.1mlGoat Anti-Bovine IgG/PE-CY5  PE-CY5标记的羊抗牛IgG 规格: 0.1ml

标准革兰氏染色液人赖氨酰氧化免疫试剂盒进口、分装

葡萄糖胰蛋白胨琼脂 英文名称：Glucose Tryptone Agar 产品规格：250g

人黑色素细胞抗体(MC Ab)免疫试剂盒现货供应

瑞氏染色液 英文名称： 产品规格：5ml*8

人丙转氨/谷丙转氨(ALT/GPT)免疫试剂盒*直销

槲皮素 ： 117-39-5 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

人ADP-核糖基化因子5(ARF5)免疫试剂盒进口、组装

小鼠游离甲状腺素(FT4)免疫试剂盒进口、分装

牛肺表面活性物质相关蛋白C(SP-C)免疫试剂盒*直销

小鼠降钙素原(PCT)免疫试剂盒现货供应

猴子内皮素1(ET-1)免疫试剂盒进口、分装